尼莫司汀联合顺铂治疗C6脑胶质瘤的实验研究

摘要

目的：脑胶质瘤是最为常见的中枢神经系统原发性肿瘤，胶质瘤的治疗是长久以来困扰着神经外科领域的难题。特别是高级别恶性胶质瘤呈弥漫浸润性生长，边界不清，术后复发率高、预后差、死亡率高。胶质瘤生物学特性决定了治疗应采取综合治疗，即以手术治疗为主，术后配合放射治疗、化学治疗、免疫治疗等。化疗在肿瘤治疗中的地位已经明确并肯定。但是在临床工作中我们发现，胶质瘤的化学治疗效果往往是难以令人满意的，由于耐药基因MGMT和血脑屏障的存在严重的影响了化疗药物发挥作用。本次研究的目的是通过体外实验和大鼠动物模型的体内实验来探讨ACNU与CDDP联合应用治疗胶质瘤的效果，并与单纯使用ACNU或CDDP的疗效相比较，分析临床联合用药的可行性和有效性。 材料与方法：体外培养鼠胶质瘤C6细胞，随机分为4组，对照组、CDDP组、ACNU组和ACNU+CDDP组。依据临床药物应用剂量通过公式计算出实验用药剂量，四组分别给予化疗药物。运用流式细胞术检测细胞周期、Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡。建立Wistar大鼠颅内C6胶质瘤模型，经Gd-DTPA强化MRI扫描证实种瘤成功，随机分为4组，分组方法同上。各组连续给药3天后处死部分大鼠，HE染色对肿瘤组织进行形态学观察，免疫组织化学法检测增殖相关蛋白PCNA及凋亡相关蛋白bcl-2的表达情况；观察剩余大鼠的生存情况。 结果：体外实验可以观察到ACNU+CDDP组较其余三组对药物更为敏感，细胞大量死亡，剩余细胞形态明显瘦弱。细胞凋亡检测示ACNU+CDDP组凋亡率增加，凋亡率为2.1％，与其它三组比较有显著差异（p<0.01）。荷瘤大鼠动物实验中，大鼠出现活动减少，精神萎靡，饮食减少，并逐渐出现功能障碍，平均生存期为29.41天，生存期比较分析显示ACNU+CDDP组大鼠的生存期明显长于其余三组。病理学检测发现ACNU+CDDP组出现明显的细胞形态大小不一，核大深染，细胞呈极性排列，不规则，并存在大面积的凋亡、坏死。肿瘤边缘离散灶的计数分析联合用药组要大大少于其余三组，有显著统计学差别。免疫组化检测中PCNA阳性表达定位于胞核，联合用药组的表达率最低，为44.84％； Bcl-2蛋白阳性表达定位于胞浆，联合用药组的表达率也最低（p<0.01）。 结论：本研究中细胞实验和动物实验结果一致，ACNU+CDDP联合用药比单药组更有效抑制胶质瘤细胞增殖，并促进细胞凋亡发生，表明两药联合治疗胶质痛的效果明显优于单独使用ACNU或CDDP。在临床研究中也同样发现ACNU、CDDP联合72小时输注可以有效的抑制肿瘤的生长，但严重的骨髓抑制影响了该化疗方案的反复进行。本次在组织病理学中的研究还发现联合用药组肿瘤组织内部有大量的坏死，肿瘤周围的离散灶明显的减少。综合上述结论我们考虑是否可以在手术治疗前先使用ACNU、CDDP联合辅助化疗，降低术后肿瘤的复发率，延长生存期，并使位于丘脑、脑干、运动区等重要功能区而无法手术的患者重新获得手术的机会。新辅助化疗可能会为胶质瘤的治疗带来新的希望。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述 胶质瘤化疗现状与耐药机制

致谢