高泌乳素血症中巨泌乳素检测的研究

摘要

泌乳素(PRL)是垂体前叶嗜酸性细胞合成的一种多肽激素,通过凝胶过滤色谱(GFC)法确认人体内主要存在3种不同分子量形式的PRL,分别为23kDa的单体PRL(monomerie PRL)、45～60kDa大PRL(big PRL)和分子量>100kDa大大PRL(big-big PRL)即巨泌乳素(MP)。正常人血清中单体PRL约占85％～95％,MP仅约占1％。由内外环境因素引起的血清PRL升高至女性>25ng/ml、男性>20ng/ml时称高泌乳素血症,PRL的正确检测关系到临床正确诊断、合理治疗及预后判断。文献报道临床检测方法不能区分PRL,与MP,因而影响样本检测,干扰临床高泌乳素血症的诊断例。
　　 GFC法是检测MP公认的金标准,但因检测技术较复杂,检测时间长且费用昂贵而不适合临床的应用,目前国外已有采用聚乙二醇沉淀(PEG)法进行MP检测的报道。但PEG可能会干扰某些检测系统,因此目前国际上对其可行性研究的结论并不一致。
　　 目的:
　　 1.建立GFC分离检测血清MP的方法,并对PEG沉淀法与GFC法进行可行性比较研究。
　　 2.利用PEG沉淀法结合临床资料进行分析,确定临床MP血症的发生率,为如何避免干扰提出建议,以期提高实验室诊断水平,指导临床诊治。
　　 方法：
　　 1)经BayerACS180化学发光免疫检测仪测定血清PRL浓度确定26例高泌乳素血症样本,将所有样本分为两组,其中一组采用Sephadex G100(80cm×1.6cm)GFC层析分离血清中三种不同分子量组分PRL,联合BayerACS180全自动化学发光免疫检测仪检测各组分PRL免疫活性,从而将样本分为真性高泌乳素血症(真泌)及MP血症(巨泌)两组；另一组样本进行PEG沉淀处理,联合化学发光免疫检测处理后单体PRL浓度；将PEG沉淀法与GFC法结果进行相关性分析。
　　 2)高泌乳素血症患者按临床表现和影像学资料分为垂体性(A组)和功能性两组(B组)各100例,同时收集100例正常人作为正常对照组(C组)。采用BayerACS180化学发光免疫检测仪检测各组血清PEG处理前、后的PRL浓度,以回收率≤40％作为判断MP血症的标准。
　　 结果：
　　 1.GFC与PEG沉淀检测MP的相关性研究
　　 1.1真泌组与巨泌组PEG处理前、后PRL浓度比较:结果显示真泌组与巨泌组血清处理前总PRL浓度分别为95.60ng/ml和64.43ng/ml,无统计学差异;处理后真泌组和巨泌组PRL浓度分别为66.86ng/ml和12.00ng/ml,差异有统计学意义。
　　 1.2 GFC法与PEG法检测真泌组与巨泌组单体PRL浓度:结果显示2种方法检测真泌组和巨泌组单体PRL浓度无统计学差异,真泌组分别为68.96ng/ml和66.86ng/ml;巨泌组分别为11.82ng/ml和12.00ng/ml。
　　 1.3 GFC法与PEG法检测真泌组与巨泌组单体PRL回收率比较:结果显示2种方法检测单体PRL的回收率比较无统计学差异,真泌组分别为69.17％和76.93％；巨泌组分别为24.94％和19.89％。
　　 1.4 GFC法与PEG法检测26例HPRL血清单体PRL回收率的相关性比较:结果显示PEG法与GFC法具有良好的相关性。
　　 1.5 PEG沉淀MP方法的重复性评价:高值混合血清批内、批间检测的CV值分别为6.34％和8.08％；低值混合血清批内、批间检测的CV值分别为6.12％和9.19％。
　　 2.高泌乳素血症中MP血症的发生率比较
　　 2.1垂体组、功能组及正常对照组血清标本经PEG处理前、后PRL值及回收率比较:PEG处理以前三组的PRL浓度分别为88.17ng/ml、42.93ng/ml和8.65ng/ml,组间差异显著。PEG处理以后三组的PRL浓度分别为62.17ng/ml、21.20ng/ml和6.10ng/ml,组间差异有统计学意义。其中垂体组PRL浓度在PEG处理前、后均显著高于相应的正常对照组和功能组、功能组在PEG处理前、后均高于正常对照组。经PEG处理后三组的回收率(％)比较有显著性差异,分别为61.91％、50.11％和69.50％,其中正常对照组高于垂体组和功能组,垂体组高于功能组。
　　 2.2三组中MP血症发生率:三组MP血症的发生率分别是3％、25％和1％。其中功能组MP血症发生率显著高于垂体组和正常对照组,而垂体性组与正常对照组无显著性差异。
　　 结论：
　　 1.PEG法与GFC法检测单体PRL显示出良好的相关性,PEG法简便易行、经济实用,可被推荐为临床高泌乳素血症的常规检测方法。
　　 2.高泌乳素血症患者血清中含有MP,明显干扰血清PRL的检测,以对功能性高泌乳素血症的影响最大。应用PEG处理法能去除MP的干扰,有助于提高临床医师对高泌乳素血症诊断的准确率,从而进行切实有效的治疗与随访。