新型骨生物活性材料的实验研究

摘要

目的：
　　 本研究旨在探讨β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate，β-TCP)/P-15复合材料骨诱导活性，为临床使用此材料提供实验依据和理论基础。
　　 方法：
　　 1.制备β-TCP/P-15复合材料：将β-TCP放到P-15多肽溶液中，轻微震荡以确保P-15充分吸附到β-TCP中，室温条件下放置24 h，再用PBS洗去未吸附的P-15，干燥后，室温条件下储存在防潮容器中备用。
　　 2.在B-TCP/P-15和β-TCP上分别培养C2C12细胞6天，分别于培养的第2，4和6天取材，扫描电镜观察细胞生长情况；CCK-8法检测细胞增殖情况；BCA法检测蛋白质含量；碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性
　　 3.下颌骨体部制备骨缺损：实验组1(β-TCP/P-15)、实验组2(β-TCP)随机植入同一只实验兔左侧或右侧下颌骨缺损区，对照组随机选取另外一只实验兔左侧或右侧下颌骨制备骨缺损，但不植入任何材料。分别在术后第4周、8周和12周处死动物，行大体观察、组织学染色观察及成骨面积的测定。
　　 结果：
　　 1.β-TCP组与β-TCP/P-15组的细胞增殖情况与蛋白含量随时间的延长而呈增加趋势，β-TCP/P-15组较β-TCP组各相同时点细胞增殖及蛋白含量明显上升，差异有统计学意义(P<0.05)；2组在细胞与材料复合培养2d时均未检测出碱性磷酸酶的活性，培养4、6 d后细胞内碱性磷酸酶的活性随时间的延长而呈增加趋势，β-TCP/P-15组较β-TCP组各相同时点碱性磷酸酶的活性明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。
　　 2.大体标本观察：3组骨缺损区骨痴量和骨强度随时间延长而逐渐增多，且各时间点β-TCP/P-15组的骨痴量最多、骨强度最高，空白组最差，12周时，β-TCP/P-15组与β-TCP组材料都已基本吸收；组织学观察：各组骨基质随时间延长而逐渐增多，且各时间点β-TCP/P-15组骨基质分别较β-TCP组和空白组多，空白组最差；成骨面积的测定：随着时间的延长，3组的成骨面积均增加，同一组不同时间段比较差异有统计学意义(P<0.05)，β-TCP/P-15组成骨面积增加较快；各个时间点β-TCP/P-15组成骨面积均强于对照组(P<0.05)。
　　 结论：
　　 本实验中所用的β-TCP/P-15复合材料具有良好的骨诱导活性、降解性、生物相容性以及成骨性能，可促进骨缺损的修复。有望作为骨修复材料用于下颌骨缺损的治疗。