环孢素A对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

摘要

目的:
　　探讨环孢素A(CsA)预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用及可能的作用机制。观察CsA预处理对离体大鼠心脏血流动力学、乳酸脱氢酶活性、心肌梗死面积、嘌呤代谢物、嘌呤代谢酶、线粒体Na+，K+-ATP酶与Ca2+-ATP酶活性、线粒体肿胀程度的影响。
　　方法:
　　48只大鼠随机分为3组：对照组、缺血再灌注组和药物处理组，每组16只。应用Langendorff离体心脏灌注模型对大鼠离体心脏进行逆行灌注。对照组：K-B液持续灌注90min。缺血再灌注组(再灌组)：逆行灌注平衡10min，再持续灌注20min缺血处理30min，再持续灌注30min。药物处理组(CsA组)：离体心脏逆行灌注平衡10min，用含有0.1mmol/L环孢素A的K-B液灌注20min后缺血处理30min，再持续灌注30min。每组随机选择8只在灌注开始后的5min、10min、20min、30min测量其心率(HR)、主动脉流量(AF)、冠脉流量(CF)、心输出量(CO)，灌注结束后接取冠脉流出液用于测定乳酸脱氢酶(LDH)活性及嘌呤代谢物含量，将心肌染色后测心肌梗死面积，另8只则利用差速离心法提取线粒体，测量其Na+，K+-ATP酶与Ca2+-ATP酶活性、线粒体肿胀程度及嘌呤代谢酶的活性。
　　结果:
　　1.5min时即稳定期，三组各项指标间的差异均无统计学意义。10min、20min时，三组间各项指标无显著性差异。在30min时，CsA组冠脉流量与对照组和缺血再灌注组相比有轻微增加(P<0.05)。其余指标无显著性差异。
　　2.对照组无梗死，且灌流液中LDH活性也较低。CsA组与再灌组均有明显的梗死区以及LDH活性增高(P<0.05)。与再灌注组相比，CsA组梗死面积减小31.1％，LDH活性降低26.3％。
　　3.再灌注组线粒体Na+，K+-ATP酶活性、Ca2+-ATP酶活性均比CsA组和对照组低(P<0.05)，CsA组与对照组无统计学筐异。
　　4.再灌注组和CsA组线粒体肿胀程度均较对照组高，CsA组比再灌注组低(P<0.05)。并且存在统计学意义。
　　5.CsA对缺血再灌注心肌能量代谢的影响：与再灌组相比，CsA组嘌呤代谢产物的释放量均有显著降低(P<0.05)。次黄苷和腺苷明显增多，尿酸明显减少。
　　6.CsA对嘌呤核苷酸代谢途径以及补救合成途径酶活性的影响：环孢素A处理组与缺血再灌注组相比，5’-核苷酸酶，腺苷脱氨酶，黄嘌呤氧化酶活性均明显增加(P<0.05)，嘌呤核苷磷酸化酶的活性明显降低(P<0.05)。
　　结论:
　　1.CsA预处理使血流动力学产生微弱改变，但CsA组与再灌组的血流动力学参数无统计学意义。CsA对血流动力学无影响。
　　2.CsA预处理能够缩小心肌梗死面积；减少缺血再灌注时心肌细胞LDH的释放，对缺血再灌注心肌具有保护作用。
　　3.CsA预处理可以维护线粒体Na+，K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性，降低线粒体肿胀程度，减弱心肌缺血再灌注损伤程度。
　　4.再灌注时嘌呤代谢产物增加表明嘌呤核苷酸降解加速，ATP合成减少。CsA预处理明显减少了嘌呤代谢产物的含量(P<0.05)，有助于ATP的补救合成。与缺血再灌注组相比，CsA组表现较高的酶活性，5’-核苷酸酶，腺苷脱氨酶，黄嘌呤氧化酶活性均明显增加(P<0.05)，嘌呤核苷磷酸化酶的活性明显降低(P<0.05)，有利于嘌呤代谢的补救合成途径，对心肌具有保护作用。