脱氢表雄酮对卵巢储备功能下降患者IVF治疗结局及大鼠卵巢雄激素受体表达的影响

摘要

目的:通过对卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve，DOR)患者体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)周期前应用脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone，DHEA)辅助治疗，来探讨DHEA对DOR患者卵巢储备功能、卵巢反应性及IVF周期治疗结局的影响，从而为临床应用提供理论依据。并且通过研究不同年龄组雌性大鼠血清DHEA、抗苗勒氏管激素（Anti-Mullerian Hormone，AMH）水平和卵巢雄激素受体(androgen receptor, AR)表达的变化规律，及DHEA对大鼠血清AMH水平和卵巢AR表达的影响，探讨DHEA改善卵巢功能的可能机制。
　　 方法:研究过程分为两部分进行。
　　 第一部分:回顾性分析2009年1月至2012年12月在天津医科大学总医院生殖医学中心接受IVF/ICSI-ET治疗的卵巢储备功能下降患者277例，根据IVF周期超促排卵前是否接受DHEA辅助治疗，将患者分为研究组和对照组:研究组患者行垂体降调节治疗前口服DHEA25 mg每日三次辅助治疗，疗程为3-4个月;对照组患者IVF周期前未使用DHEA辅助治疗。比较两组患者的一般情况（年龄、不孕年限、BMI、基础激素水平、窦卵泡计数等）、超促排卵情况(Gn总量、Gn使用天数、HCG日E2水平、卵泡数、获卵数、成熟卵母细胞数、获卵率等）、胚胎发育（受精数、卵裂数、优质胚胎数、受精率、卵裂率、优质胚胎率等）及临床治疗结局（胚胎种植率、临床妊娠率、流产率及周期取消率）;比较研究组患者使用DHEA前后血清基础激素水平、窦卵泡数等卵巢储备功能指标的变化。
　　 第二部分:1、幼年期、青春期、性成熟期和老龄期SD雌鼠各20只，运用ELISA法检测大鼠血清DHEA、AMH水平，real-time PCR法检测大鼠卵巢内AR mRNA的表达水平，比较大鼠血清DHEA、AMH水平及卵巢AR mRNA表达的增龄性变化。2、将老龄期大鼠40只随机平均分为DHEA治疗组和对照组，DHEA治疗组大鼠每日灌服DHEA油溶液，对照组大鼠每日灌服等体积大豆油，共30天。比较两组大鼠血清DHEA、AMH水平及卵巢AR mRNA表达强弱。
　　 结果:
　　 第一部分:两组患者一般情况、Gn总量和Gn使用天数均无统计学差异（P＞0.05）;研究组HCG日E2水平、卵泡数、获卵数、获卵率显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）;研究组与对照组卵母细胞成熟率、受精率、卵裂率和优质胚胎率比较无显著性差异(P＞0.05);研究组临床妊娠率显著高于对照组（P＜0.05），胚胎种植率较对照组有升高趋势，周期取消率较对照组有降低趋势，但差异不具有统计学意义(P＞0.05)，两组患者流产率无显著性差异(P＞0.05)。研究组患者DHEA辅助治疗后基础窦卵泡数显著增加（P＜0.05），基础FSH呈降低趋势，T水平呈增高趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　 第二部分:老龄期大鼠血清DHEA、AMH水平以及卵巢AR mRNA的表达水平均显著低于其他三组(P＜0.05)。DHEA治疗后大鼠血清DHEA水平显著高于对照组（P＜0.05），AMH水平治疗组较对照组有增高趋势，但差异尚不具有统计学意义（P＞0.05），卵巢AR mRNA表达量DHEA治疗组显著高于治疗对照组（P＜0.05）。
　　 结论:
　　 1.DHEA辅助治疗可以改善卵巢储备功能，提高DOR患者的卵巢反应性，改善IVF治疗结局。
　　 2.DHEA对卵母细胞和胚胎的质量无显著影响，有待进一步研究综合评价。
　　 3.随着年龄的增长，血清DHEA、AMH水平及卵巢AR mRNA的表达下降。
　　 4.补充DHEA可以上调卵巢AR的表达，提高血清AMH，推测DHEA可能通过AR的作用改善卵巢储备功能。

目录

声明

摘要

缩略语／符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、脱氢表雄酮对卵巢储备功能下降患者IVF-ET治疗结局的影响

1．材料和方法

1．1 材料

1．2 方法

1．3 统计学方法

2 结果

2．1 两组患者一般资料及卵巢储备功能参数比较

2．2 两组患者临床与实验室治疗参数比较

2．3 两组患者治疗结局比较

2．4 研究组DHEA治疗前后卵巢储备功能参数比较

3 讨论

3．1 卵巢储备功能下降的原因及DOR患者卵巢储备功能的评价和预测

3．2 DHEA的基础研究及代谢过程

3．3 DHEA对卵巢储备功能的影响

3．4 DHEA对卵巢反应性、胚胎质量及IVF治疗结局的影响

3．5 DHEA的安全性

3．6 需要解决的问题

4 小结

二、脱氢表雄酮对大鼠卵巢雄激素受体表达的影响

1 材料和方法

1．1 材料

1．2 方法

1．3 统计学方法

2 结果

2．1 不同年龄组大鼠血清DHEA、AMH浓度的比较

2．2 血清DHEA与AMH水平之间的相关性分析

2．3 不同年龄组大鼠卵巢AR mRNA表达量的变化

2．4 DHEA治疗组与治疗对照组大鼠血清DHEA、AMH水平及卵巢AR mRNA表达量的比较

3 讨论

3．1 女性体内DHEA、AMH及AR的作用及增龄性变化

3．2 DHEA在卵泡生长发育中的作用及其对卵巢储备功能的影响

3．3 DHEA作用的传导通路

3．4 展望

4 小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述 脱氢表雄酮在卵巢储备功能下降患者体外受精-胚胎移植中的应用

致谢