基质金属蛋白酶-9水平及基因启动子-1562C/T变异与冠状动脉扩张发病关系

摘要

目的：
　　研究人基质金属蛋白酶-9(Matrix Metalloproteinase-9，MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)、MMP-9/TIMP-1与冠状动脉扩张症(coronary artery ectasia, CAE)的关系;了解MMP-9基因启动子-1562编码处碱基C/T在CAE患者中的分布情况，探讨MMP-9基因变异与MMP-9水平之间的关系及MMP-9基因变异对CAE的影响。
　　方法：
　　1、对经冠状动脉造影术(coronary angiography，CAG)确诊的59例冠状动脉扩张患者(CAE)、61例冠心病患者(coronary artery disease，CAD)、55例冠状动脉无病变的对照者(NCA)进行研究。了解CAE患者的临床及影像学特点。
　　2、采用酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定血清MMP-9、TIMP-1水平，比较三组患者MMP-9、TIMP-1水平及MMP-9/TIMP-1的比值，比较CAE不同类型患者及不同病变支数患者的MMP-9、TIMP-1水平及MMP-9/TIMP-1的比值。
　　3、采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)及限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)分析技术，分析三组患者MMP-9基因启动子-1562C/T基因型的分布;确定三组患者是否符合Hardy-Weinberg遗传平衡;比较CAE患者不同病变支数间及不同类型间的基因型及等位基因频率;比较CAE患者CC基因型与CT+TT基因型所对应MMP-9的水平。
　　结果：
　　1、CAE患者临床表现与CAD比较无显著差异（P＞0.05）;冠脉造影结果显示CAE最常受累的血管是右冠(78％)，其次为左前降支(58％)，再次为左回旋支(49％);单支受累的患者占44％，而三支受累者占36％;在病变类型中，Ⅰ型病变发生率为42％。
　　2、CAE组MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值高于CAD组，但差异无统计学意义(P＞0.05); CAE组MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值高于NCA组，差异有统计学意义(P＜0.05）;三组TIMP-1水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　3、CAE组不同类型患者的血清MMP-9、TIMP-1水平及MMP-9/TIMP-1比较无显著差异(P＞0.05）;虽然随着病变支数的增加，MMP-9水平有逐渐增高的趋势，但差异仍无统计学意义（P＞0.05）。
　　4、CAE组三种基因型CC、CT及TT分布频率分别为0.80，0.17和0.03，CAD组中分布频率为0.79，0.19和0.03，NCA组中分布频率为0.69，0.29和0.02，三组间基因型分布差异无统计学意义（x2=2.11，P=0.35）;等位基因分布频率:CAE组为C=0.88、T=0.12，CAD组为C=0.87、T=0.13，NCA组为C=0.87、T=0.13，三组间等位基频率比较，其差异无统计学意义(χ2=0.04，P=0.98)。
　　5、对CAE组不同病变支数患者的MMP-9基因型及等位基因频率进行比较，发现无显著差别（P＞0.05）;对不同病变类型CAE患者的MMP-9基因型及等位基因分布进行比较，也无显著差别（P＞0.05）。
　　6、CAE组患者中T等位基因携带者血清MMP-9水平比非T等位基因携带者高，但差异无统计学意义(P＞0.05); CAD组及NCA组结果差别也无统计学意义（P＞0.05）。
　　结论：
　　1、血清MMP-9水平、MMP-9/TIMP-1与CAE的发病相关。
　　2、在CAE患者中MMP-9基因启动子-1562C/T存在着不同的基因型，但这种基因型的分布与CAD组和NCA组比较无显著差异性。
　　3、MMP-9基因启动子-1562C/T的变异与CAE的易感性不存在相关性，与血清MMP-9水平也不存在相关性，T等位基因还不能被证明是CAE发生的遗传易感因素。

目录

声明

摘要

缩略语／符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

材料与方法

1 研究对象

1．1 入选对象

1．2 入选及排除标准

2 实验室检测

2．1 血标本的采集

2．2 实验仪器

2．3 实验试剂

2．4 主要试剂的配制

2．5 MMP-9基因多态性检测

2．6 血清MMP-9测定

2．7 血清TIMP-1测定

3、统计学方法

结果

1 研究对象的一般临床资料和冠脉造影特点

1．1 一般临床资料

1．2 CAE患者冠脉造影特点分析

2 各组血清指标比较

2．1 三组血清MMP-9、TIMP-1及MMP-9／TIMP-1水平

2．2 CAE组分型及病变支数的血清指标比较

3 MMP-9基因多态性检测结果

3．1 MMP-9基因多态性判读

3．2 研究对象的Hardy-Weinberg遗传平衡检测

3．3 MMP-9基因型及等位基因频率的分布

3．4 MMP-9基因变异与CAE疾病的相关性分析

4 三组各基因型对应MMP-9浓度的比较

讨论

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

附录

综述 冠状动脉扩张症的研究进展

致谢