表观遗传因子EZH2在T细胞淋巴瘤中的表达和预后研究

摘要

目的:
　　本研究旨在从转化医学角度探索T细胞非霍奇金淋巴瘤(T cellnon-Hodgkin's lymphoma，T-NHL)组织和细胞中EZH2蛋白的表达情况，分析EZH2阳性表达与患者不同临床病理特征及预后生存之间的关系，并探讨其可能的作用机制和临床意义。
　　方法:
　　收集并选取2007年1月-2012年6月经天津市肿瘤医院确诊并有完整的临床、病理和随访资料的55例初治T-NHL患者作为实验组。以13例淋巴结增生患者作为对照组。回顾性分析患者的性别、年龄、ECOG评分、B症状有无、外周血白细胞(WBC)计数、血红蛋白(Hb)数值、血乳酸脱氢酶(LDH)数值、β2微球蛋白(β2-MG)水平、肿瘤细胞增殖指数（Ki-67）、骨髓是否累及、病理亚型、原发灶部位、Ann Arbor分期、脾是否肿大以及IPI评分等临床病理资料。采用免疫组化染色方法（immunohistochemistry，IHC）检测肿瘤组织和对照组织中EZH2蛋白的表达情况，采用蛋白质印迹法(Western Blot，WB)检测T-NHL细胞系Hut-78细胞中EZH2的表达情况，在细胞水平进一步验证免疫组化的结果。分析EZH2阳性表达与T-NHL患者不同临床病理特征及预后生存之间的关系，探讨EZH2对T-NHL的临床意义。
　　结果:
　　1、通过免疫组化染色，发现EZH2蛋白在T-NHL组织中的表达明显高于对照组织（阳性率:72.7％vs.0％），差异具有统计学意义(x2=22.961，P=0.000)。
　　2、蛋白质印迹法显示EZH2在T-NHL细胞系Hut78细胞中明显高表达。
　　3、统计学分析发现EZH2的表达与T-NHL患者的性别、年龄、ECOG评分、Hb、β2微球蛋白、病理亚型、原发灶部位和脾大这些临床特征无关(P＞0.05)，而与B症状(P=0.013)、外周血白细胞计数(P=0.032)、LDH(P=0.008)、Ki-67(P=0.011)、骨髓受累(P=0.004)、Ann Arbor分期(P=0.002)及IPI评分(P=0.028)显著相关。
　　4、EZH2阳性患者的远期生存率，尤其是5年生存率明显低于EZH2阴性患者(21.4％vs.51.3％)。与EZH2阴性患者相比，EZH2阳性患者的中位生存期较短，差异具有统计学意义(30vs.44，P=0.002)。因此，EZH2蛋白的阳性表达可以影响T-NHL患者的远期生存。
　　5、单因素分析显示EZH2蛋白阳性表达是影响T-NHL患者预后的不良因素(P=0.046)。此外，性别、年龄、B症状、LDH、Ki-67、骨髓受累及原发灶部位也与T-NHL患者的OS呈负相关(P＜0.05)。
　　6、多因素分析显示EZH2的阳性表达尚不能作为T-NHL患者的独立预后因子(P＞0.05)。
　　结论:
　　综上所述，EZH2蛋白在T-NHL肿瘤组织和细胞中显著高表达，而且与患者的B症状、外周血白细胞计数、LDH水平、Ki-67、骨髓受累、Ann Arbor分期及IPI评分相关。临床表现有B症状、外周血白细胞计数和LDH水平高于正常、Ki-67＞30％、骨髓受累、Ann Arbor分期为晚期（Ⅲ-Ⅳ期）以及IPI评分较高(3-5)的患者，EZH2蛋白的表达水平较高。因此EZH2参与T-NHL的发生发展，其阳性表达是影响患者总生存和预后的不良因素。这可能为临床提供分层的、更加个体化的预后预测和治疗方案，尤其是对于对传统化疗方案不敏感、预后较差的T细胞非霍奇金淋巴瘤的治疗提供潜在的治疗靶标具有重要临床意义。
　　本研究旨在从转化医学角度探索T细胞非霍奇金淋巴瘤(T cellnon-Hodgkin's lymphoma，T-NHL)组织和细胞中EZH2蛋白的表达情况，分析EZH2阳性表达与患者不同临床病理特征及预后生存之间的关系，并探讨其可能的作用机制和临床意义。

目录

声明

摘要

缩略语／符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

对象和方法

1．1 实验材料及仪器

1．2 实验方法

1．3 统计学方法

实验结果

2．1 免疫组化法检测T-NHL组织中EZH2蛋白的表达情况

2．2 免疫印迹法检测T-NHL细胞系中EZH2蛋白的表达情况

2．3 EZH2蛋白的表达与T-NHL患者临床病理特征之间的关系

2．4 EZH2蛋白的表达与T-NHL患者总生存时间(OS)之间的关系

2．5 EZH2蛋白的表达与T-NHL患者预后之间的关系

讨论

3．1 T-NHL的临床病理特征及研究现状

3．2 多疏基因家族(Polycomb Group，PcG)的概述

3．3 EZH2的理化性质

3．4 EZH2的生物学作用

3．5 EZH2在其他肿瘤中的表达情况、临床意义及作用机制

3．6 EZH2在T-NHL的表达情况、临床意义及作用机制

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述 表观遗传调控因子EZH2在肿瘤发生发展中的研究进展

致谢