替米沙坦对胰岛素抵抗OLETF大鼠心房肌L型钙通道α1C亚单位表达的影响

摘要

目的:本实验以高脂饲料饲养自发性高血糖大鼠（otsuka long-evans tokushima fatty， OLETF），胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）实验动物模型造模成功后，以替米沙坦进行药物干预，旨在：1、研究IR-OLETF大鼠心房肌L型钙通道α1C亚单位（L-type calcium channelα1C subunit，Cav1.2）的表达水平；2、研究血管紧张素II受体1型拮抗剂（angiotensin II type1 receptor blocker，ARB）替米沙坦对IR-OLETF大鼠的心房肌Cav1.2蛋白表达的影响；3、探讨替米沙坦对心房肌Cav1.2蛋白表达的影响及其改善IR的可能机制。
　　方法:LETO（long-evans tokushima fatty）大鼠（雄性，1月龄，无特定病原体级）共计16只，OLETF大鼠（雄性，1月龄，无特定病原体级）共计32只,，体质量范围在135至185g，所有实验动物在标准饲料及干净整洁环境条件下适应性饲养1月。在2月龄时，所有OLETF大鼠以高脂饲料进行喂养，于7月龄时停止进食12小时后于股静脉处取血，测定所有实验动物的血清胰岛素（fasting insulin，FINS）、空腹血糖（fasting blood glucose， FBG）的数值，并通过相关公式分析得出胰岛素抵抗指数（insulin resistance index，HOMS-IR），分析大鼠胰岛素抵抗模型是否造模成功。
　　用随机数字表法将32只造模成功的IR-OLETF大鼠分为2组，16只模型组（M）的大鼠继续以高脂饲料饲养，16只替米沙坦（T）组大鼠以高脂饲料饲养并加用替米沙坦（5mg/kg﹒d）进行干预，16只LETO大鼠作为正常对照（NC）组，始终以标准饲料进行饲养。按上述方法饲养大鼠5月后，所用大鼠再次停止进食12小时后于股静脉处取血，通过放射免疫法检测 FINS，以葡萄糖酶法检测 FBG，使用全自动生化分析仪检测甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、总胆固醇（total cholesterol， TC）及低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）。然后使用脊椎脱臼法处死所用大鼠，迅速取出实验动物内脏（心脏、肝脏、肾脏、眼球等）组织保存于冻存管中，置入-80℃冰箱中低温密闭封存，使用为蛋白质印迹法检测所有实验动物心房肌组织中Cav1.2蛋白的表达量。采用SPSS20.0统计软件将所得结果进行计算分析。
　　结果:
　　1、三组间实验大鼠的FINS，FBG，HOMA-IR的比较：T组和M组比较， FINS，FBG，HOMA-IR的数值明显降低，差异具有统计学意义；和NC组相比较，M组的FINS，FBG，HOMA-IR的数值显著增高，差异具有统计学意义（P<0.05）。
　　2、三组间实验大鼠血脂代谢水平的比较：T组和M组比较，LDL-C，TG， TC的数值显著降低，差异具有统计学意义（P<0.05）。但HDL-C的数值无明显改变，差异无统计学意义（P=0.384）；M组LDL-C，TG，TC的数值明显高于NC组，HDL-C数值明显低于NC组。
　　3、三组间实验大鼠心房肌组织Cav1.2蛋白表达含量的比较：T组与M组相比，心房肌组织中Cav1.2蛋白水平明显升高，M组与NC组相比，心房肌组织中Cav1.2蛋白水平明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）。
　　结论:
　　1、通过高脂饲养并成功建立胰岛素抵抗模型的OLETF大鼠血清中FINS， FBG，HOMA-IR，TG、LDL-C和TC数值显著升高，HDL-C数值显著降低。
　　2、替米沙坦干预后，IR大鼠血清FBG，FINS，HOMA-IR，TC，TG和LDL-C水平明显降低，表明替米沙坦可以通过改善IR大鼠的糖脂代谢，改善其胰岛素抵抗。
　　3、OLETF大鼠心房肌组织中Cav1.2的表达水平发现，胰岛素抵抗大鼠心房肌组织中Cav1.2蛋白的含量明显减少，而使用替米沙坦进行药物干预后其表达水平回升。

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缩略语

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、对象和方法

1.1研究对象

1.2 主要试剂及仪器

1.3 主要实验试剂的配制及稀释

1.4 实验动物饲养及分组

1.5 标本采集与保存

1.6 主要指标检测方法

1.7 统计学方法

二、结果

2.1 OLETF大鼠胰岛素抵抗模型建立

2.2各组间FBG, FINS, HOMA-IR和ISI的比较

2.3 各组血脂水平的比较

2.4 Cav1.2蛋白在各组心房肌组织中表达量的变化

三、讨论

3.1胰岛素抵抗与相关的心血管疾病

3.2代谢综合症增加心房颤动发生的可能机制

3.3 替米沙坦—胰岛素抵抗合并高血压患者的新选择

结论

1. 替米沙坦可显著改善胰岛素抵抗

2. 替米沙坦可影响胰岛素抵抗大鼠心房肌Cav1.2的表达

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述: 代谢综合征与房颤相互关系的研究进展

致谢