卵巢癌患者髓源性抑制细胞、调节性T细胞及其相关细胞因子的表达及临床意义

摘要

目的：
　　作为常见妇科肿瘤之一，卵巢癌死亡率高，居妇科恶性肿瘤第一位。卵巢癌目前的治疗方案是以手术为主，术后辅助化疗、放疗、生物治疗等的综合治疗。由于70％左右的患者就诊时已于晚期，综合治疗后的患者仍有80%～85%左右会于短期内出现复发与转移，严重影响到卵巢癌患者治疗的疗效与预后，威胁着患者的生命。因此，寻找新的辅助治疗方法，提高或改善现有治疗手段的效果，以期实现遏制肿瘤转移和延缓肿瘤复发、提高生存率和改善生存质量的目的。多方研究报道表明，以往多种肿瘤免疫治疗方案效果不佳的原因可能与肿瘤免疫微环境相关，现在的研究主要集中在有关肿瘤免疫抑制微环境中免疫抑制细胞及其相关细胞因子在肿瘤免疫治疗中作用，这类研究希望能在不远的将来为肿瘤的治疗带来新的突破，也将为肿瘤免疫治疗效果不佳的现状提供新的解释。本研究通过检测卵巢癌外周血中CD33+HLA-DR-/low髓系来源抑制性细胞（myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）、CD4+CD25+CD127-/low调节性 T细胞（regulatory T cells，Tregs）的含量及卵巢癌患者血清中Th1、Th2类细胞因子的表达，分析这些肿瘤免疫微环境中的重要组成因素在卵巢癌患者中的表达特点，进一步分析它们与卵巢癌各项临床病理参数的关系，为深入揭示免疫抑制因素与卵巢癌进展及治疗的关系提供依据，为探索能够全面控制肿瘤免疫抑制微环境的有效措施提供实验基础。
　　方法：
　　选择72例卵巢癌患者作为研究对象，30例健康人群作为对照组。采集清晨空腹外周血。应用流式细胞术检测外周血中CD33+HLA-DR-/low髓系来源抑制性细胞（myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）和CD4+CD25+CD127-/low调节性 T细胞（regulatory T cells，Tregs）的含量，分析二者在卵巢癌患者外周血中的表达特点，探讨二者与卵巢癌患者年龄、肿瘤大小、病理类型、病理分级、临床分期等各项临床病理参数的关系，探讨二者表达的相关性。应用BD CBA流式液相多重蛋白定量技术检测卵巢癌患者血清中Th1、Th2类细胞因子的表达及其与临床病理参数的关系。
　　结果：
　　1.卵巢癌患者外周血中MDSCs为一群CD33阳性而HLA-DR阴性表达或低表达的细胞，与健康对照组（0.762±0.214）%相比，卵巢癌患者外周血中CD33+HLA-DR-/low MDSCs的表达比例明显升高（3.391±1.931）%，差异有统计学意义（P＜0.01）；其表达水平与卵巢癌患者的年龄、肿瘤大小、病理类型无关（P＞0.05），而与卵巢癌患者病理分级、临床分期具有明显联系，差异具有统计学意义（P＜0.05）；与术前比较，手术后外周血中CD33+HLA-DR-/low MDSCs的表达水平（2.019±1.034）%明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；
　　2.卵巢癌患者外周血中Treg细胞为一群CD4和CD25双阳性而CD127低表达的细胞，平均百分比（14.068±4.546）%，较健康对照组外周血中（5.051±1.170）%显著增高，差异具有统计学意义（P＜0.01）；Treg细胞的表达与卵巢癌患者的年龄、肿瘤大小、病理类型及肿瘤分化程度均无明显的相关性（P＞0.05），而与卵巢癌患者的临床分期密切相关，具有显著的统计学差异（P＜0.05）；手术后外周血中 CD4+CD25+CD127-/low Tregs的平均百分比为（12.243±4.213）%，较术前有所降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；
　　3.卵巢癌患者外周血中 CD33+HLA-DR-/low MDSCs的表达与CD4+CD25+CD127-/low Tregs的表达具有明显的相关性（n=72，r=0.0563，P＜0.05）；
　　4.卵巢癌患者血清中的Thl类细胞因子IL-2，IFN-γ的水平明显低于正常人（P＜0.01），而Th2类细胞因子IL-6、IL-10的水平显著高于正常人（P＜0.01），IL-4，TNF的水平与健康人比较无显著差异。且早期患者血清中IL-2，IFN-γ的水平明显高于晚期患者，而IL-6、IL-10的表达水平则低于晚期患者。
　　结论：
　　卵巢癌患者外周血中免疫抑制性细胞 CD33+HLA-DR-/low MDSCs和CD4+CD25+CD127-/low Tregs含量较健康对照均明显增高，二者的表达表现出明显的相关性，且Thl类细胞因子的水平降低，Th2类细胞因子的水平增高，提示卵巢癌患者体内免疫抑制状态的形成，为寻找卵巢癌独特的免疫调节机制以逆转卵巢癌免疫缺陷、改善卵巢癌预后提供了有力的实验依据和方法基础。

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缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、卵巢癌患者骨髓来源抑制性细胞的检测和临床意义分析

1.1对象和方法

1.2结果

1.3讨论

1.4小结

二、卵巢癌患者外周血调节性T细胞的检测和临床意义分析

2.1对象和方法

2.2结果

2.3讨论

2.4小结

三、卵巢癌患者血清相关细胞因子的检测和临床意义分析

3.1对象和方法

3.2 结果

3.3讨论

3.4小结

全文结论

论文创新点

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述: 肿瘤免疫微环境的研究进展

致谢