类弹性蛋白多肽作为温敏型液体栓塞剂治疗食管胃底静脉曲张的实验研究

摘要

目的：
　　以类弹性蛋白多肽（elastin-like polypeptides，ELP）为新型的原位凝胶化的温度敏感型液体栓塞剂用于食管胃底曲张静脉的栓塞治疗，并对其可行性、安全性和有效性进行评估，为开展内镜下栓塞治疗食管胃底静脉曲张提供安全、有效、经济的新型液体栓塞材料。
　　方法：
　　（1）应用基因工程合成并优化温敏、自凝集交联的ELP：通过检测选择的3种ELP（ELP60-TYR1、ELP120-TYR1、ELP120-TYR7）的凝胶时间及相变后的黏弹性，选择其中一种可迅速发生凝集，并拥有良好的黏弹性以对抗血流冲刷，以防止异位栓塞的ELP；将选择的ELP配置成不同浓度的溶液，通过测量各种浓度相变前的粘度，选择1种最适浓度的 ELP，使其可实现室温下经内镜注射治疗，为后期体外及初步体内实验提供理论依据。
　　（2）ELP体外栓塞性能评价：构建体外栓塞模拟装置，将ELP经微导管注入，探讨 ELP体外栓塞的可行性及栓塞效果，并证实其室温下经内镜注射的可操作性。实验结束后将装有玻璃珠的玻璃容器置于37℃的环境下培养，1周后取出并检查复通性及弥散情况。
　　（3）初步评价ELP体内的栓塞效果：兔股动脉注射美蓝-ELP，初步探讨其体内栓塞可能性及栓塞后的稳定性；通过监测兔血常规、肝功能及肾功能指标，评估ELP的生物相容性；通过病理组织学检查，评估ELP体内栓塞血管的效果及稳定性；通过检查栓塞后兔的一般状况及处死后器官的大体情况，观察 ELP的异位栓塞情况。
　　结果：
　　（1）发现结构为 ELP120-Tyr7的 ELP具有较短的凝胶时间及较好的黏弹性，适合栓塞治疗。通过相变前各浓度ELP粘度的对比，浓度为750umol的ELP为栓塞血管的最适栓塞浓度，可实现内镜下注射治疗。750umol的 ELP120-Tyr7具有最佳栓塞性能，可用于进一步实验研究。
　　（2）体外栓塞模拟装置实验证实ELP可实现体外栓塞。实验后剖开微导管，未见粘管，微导管内壁光滑。被美蓝染色的 ELP凝集后均匀稳定的分布于玻璃珠上方而未有沉淀经玻璃珠流出。1周后检查玻璃容器未复通，ELP形成的凝胶具有较好的稳定性。
　　（3）ELP注入后，兔股动脉发生栓塞，栓塞后未发现异位栓塞症状，兔股动脉栓塞后血常规、肝功能及肾功能与栓塞前无明显的变化（P>0.05），术后的病理组织学证明ELP可实现初步体内栓塞。
　　结论：
　　(1)750umol结构为ELP120-Tyr7具有最佳栓塞性能，适合作为液体栓塞剂经内镜下栓塞治疗食管胃底曲张静脉。
　　(2)体外栓塞模拟装置模拟度高，可有效模拟体内环境，检验栓塞剂栓塞的可行性。ELP栓塞后较稳定，具有良好的栓塞性能，且无注射及粘管等难度。操作简便易行，符合内镜下注射的要求。
　　(3) ELP作为一种热敏性凝胶，具有良好的生物相容性，无组织损伤，可实现体内血管栓塞，且栓塞后可稳定存在于血管内，无异位栓塞。

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缩略语说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、选择具有最佳栓塞性能的ELP

1.1对象和方法

1.2实验结果

1.3小结

二、ELP体外栓塞性能评价

2.1材料和方法

2.2实验结果

2.3小结

三、初步评价ELP体内栓塞效果

3.1对象和方法

3.2实验结果

3.3小结

讨论

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述:内镜下食管胃底静脉曲张的治疗进展

致谢

个人简历