出生前DEHP暴露对大鼠下丘脑及生殖腺GnRH及GnRHR表达的影响

摘要

目的：
　　探讨出生前暴露于邻苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP）对子代雌雄鼠生殖神经内分泌系统的影响及其作用机制。
　　方法：将成功受孕的32只孕鼠随机分为溶剂对照组（玉米油）以及2 mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kgDEHP三个剂量组，每组8只。自G14~G19进行连续灌胃染毒。随机选取48只子代新生鼠，于出生后24小时内称重、断头处死后取下丘脑，提取RNA。其余子代大鼠继续饲养至出生后第21天断乳，断乳后雌雄鼠分笼饲养。子代鼠饲养至约70日龄时，从每窝中随机选择雌雄鼠各1只、每组雌雄鼠各8只，将动情间期的雌鼠和雄鼠断头处死，取下丘脑及卵巢、睾丸，随后提取RNA并进行逆转录。另外，再随机选取子代70日龄雌雄大鼠共48只，雌雄各半，每组6只，心脏灌注多聚甲醛后取下丘脑行组织切片。对新生鼠下丘脑、成年雌雄大鼠下丘脑和生殖腺GnRH及GnRHR基因进行实时荧光定量PCR检测，以及使用免疫荧光法检测成年雌雄大鼠下丘脑GnRH十肽表达情况。
　　结果：（1）方差分析结果显示，与对照组相比，新生雌鼠下丘脑GnRH及GnRHR基因相对表达水平在各组间的改变无统计学意义（P>0.05）；新生雄鼠下丘脑GnRH基因相对表达水平在各个处理组间的差异无统计学意义（P>0.05），而新生雄鼠下丘脑GnRHR基因在2 mg/kg、10 mg/kg剂量组GnRHR基因相对表达水平升高，与对照组比较差异具有统计学意义（(P<0.05）；（2）统计分析结果显示，子代雌性大鼠下丘脑POA区GnRH及GnRHR基因相对表达水平在各处理组的差异无统计学意义（P>0.05）；子代雄性大鼠下丘脑 GnRHR基因相对表达水平具有统计学意义，与对照组相比，2mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kg三个剂量组的子代雄性大鼠下丘脑GnRHR基因相对表达水平均有下降（(P<0.05）；（3）子代成年雌鼠及雄鼠下丘脑 GnRH肽的平均光密度在各组间的差异无统计学意义（P>0.05）；（4）2 mg/kg DEHP处理组的子代成年雌鼠卵巢GnRH基因相对表达水平升高，与对照组相比差异有统计学意义（(P<0.05），而GnRHR基因相对表达水平组间差异无统计学意义（P>0.05）；子代成年雄鼠睾丸 GnRH及 GnRHR基因相对表达水平组间差异无统计学意义（P>0.05）。
　　结论：（1）在本研究条件下，未发现出生前各剂量DEHP暴露影响子代新生鼠及成年鼠下丘脑GnRH基因表达，也未发现其影响成年鼠下丘脑GnRH肽的表达；在HPG轴的下丘脑水平，出生前短期低剂量DEHP暴露上调了新生雄鼠、下调了成年雄鼠的GnRHR基因表达水平，对雄性的生殖健康存在潜在影响；（2）本实验染毒剂量下，出生前 DEHP暴露对子代大鼠的影响存在性别差异性；（3）出生前 DEHP暴露对成年子代雌鼠卵巢的作用可能存在低剂量效应，但未影响雄鼠睾丸；相关机制尚需进一步研究。

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缩略语/符号说明

前言

研究背景及现状

研究目的、方法

材料和方法

1.1材料

1.2 实验方法

结果

2.1子代新生鼠下丘脑GnRH及GnRHR 基因相对表达情况

2.2成年子代大鼠下丘脑POA区GnRH及GnRHR基因相对表达情况

2.3成年子代大鼠下丘脑GnRH肽表达情况

2.4 成年子代大鼠生殖腺GnRH及GnRHR 基因相对表达情况

讨论

3.1出生前DEHP暴露对子代新生鼠下丘脑GnRH及GnRHR基因表达的影响

3.2出生前DEHP暴露对成年子代大鼠下丘脑GnRH、GnRHR基因及GnRH肽表达的影响

3.3出生前DEHP暴露对子代成年大鼠生殖腺GnRH及GnRHR基因表达的影响

3.4出生前DEHP暴露对子代大鼠GnRH及GnRHR 基因表达影响的性别差异性

3.5出生前DEHP暴露的低剂量-非线性效应

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述:环境内分泌干扰物对下丘脑生殖神经内分泌系统的影响

致谢

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