131I标记RGD纳米脂质体的裸鼠荷瘤动物模型实验研究

摘要

背景：肺癌是国内外最常见及死亡率最高的恶性肿瘤之一，目前研究新生血管生成是肺癌生物学治疗热点之一。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp，RGD）肽是一种小分子肽类，能特异性地与整合素结合，本研究应用放射性核素标记的RGD肽纳米载体，对肺癌肿瘤进行动物体内外研究。
　　目的：探讨131I-RGD-BSA-PCL核素纳米载体对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠模型进行SPECT/CT显像及其对肿瘤的抑制作用进行初步的探讨及研究。
　　方法：本研究第一部分先构建RGD纳米脂质体，并对其分子式、结构及粒径的等方面进行了描述。在细胞水平实验中通过荧光共聚焦显微镜观察该载体在H460肺癌细胞系中的靶向性结合及细胞摄取情况。采用氯氨T法标记纳米载体，构建核素纳米载体131I-BSA-PCL及131I-RGD-BSA-PCL，进行细胞摄碘实验，观察131I标记的RGD靶向性核素纳米载体的胞内停留时间，初步评估此核素纳米载体的存留效果。此外，为了观察此核素纳米载体对H460细胞的杀伤效果，采用流失细胞术观察其凋亡效果。本研究第二部分为裸鼠体内研究，采用3-4周龄雌性裸鼠进行实验，将裸鼠随机分为131I-BSA-PCL组、131I-RGD-BSA-PCL组、131I对照组及生理盐水对照组，研究核素纳米载体在荷瘤裸鼠体内的生物分布、各组荷瘤裸鼠SPECT/CT断层显像及各治疗组对肿瘤的治疗疗效观察等。
　　结果：细胞水平实验中，经荧光共聚焦显微镜观察证明 H460细胞对RGD-BSA-PCL、BSA-PCL两种纳米载体均有明显摄取，包括细胞质和细胞核， RGD-BSA-PCL存留于细胞内的时间比BSA-PCL长。摄131I实验显示131I能快速被H460细胞摄取，并于加入核素纳米载体后4h达到高峰，131I-RGD-BSA-PCL的最高摄碘率要高于131I-BSA-PCL。凋亡实验表明两种核素纳米载体对肺癌H460细胞系具有明显的杀伤作用，对于抑制肿瘤的生长起着重要作用。体内实验中，生物分布实验结果示肿瘤对131I-BSA-PCL组摄取率在24h、48h、72h分别为11.06±2.15％,10.31±3.04%g,3.83±0.87%，131I-RGD-BSA-PCL组摄取率在24h、48h、72h分别为39.49±6.06%,9.99±3.11%g,6.9±1.43%，RGD组生物分布明显高于非RGD组，差异有统计学意义(p＜0.05)，而两种核素纳米载体组其他组织包括心、肝、脾、肺、肾、脑、骨、胃及小肠等摄取率未见明显差异。体内显像研究表明，核素纳米载体组肿瘤可见明显清晰显像，131I对照组在24h时肿瘤可见微弱信号，生理盐水对照组无信号。而在治疗疗效方面，截止到接受不同治疗后27天，与对照组相比较，治疗组肿瘤体积生长受到明显抑制、小鼠体重下降幅度显著减慢。病理切片HE染色示治疗组裸鼠主要器官（心、肝、脾、肾）未见明显组织破坏。对照组中镜下可见肿瘤细胞大小不一，形态各异，并可见核分裂相；同时治疗组中镜下可见大片肿瘤细胞变性坏死。
　　结论：131I标记的两种纳米脂质体RGD-BSA-PCL和BSA-PCL对NCI-H460人大细胞肺癌裸鼠移植瘤具有明显的抑制肿瘤细胞生长增值作用，其中131I-RGD-BSA-PCL能较长的停留在肿瘤细胞内，明显增加其在肿瘤细胞内的存留时间，而对荷瘤裸鼠主要器官无明显毒副作用。

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缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

第一部分：核素纳米载体细胞学实验

1.1对象和方法

1.2实验结果

1.3讨论

1.4小结

第二部分：核素纳米载体动物学实验

2.1 对象和方法

2.2实验结果

2.3讨论

2.4 小结

结论

本研究的创新之处

本研究中的不足

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述: 核素纳米药物在肿瘤显像及治疗中的研究进展

致谢

个人简历