富马酸二甲酯对β淀粉样蛋白诱导的氧化应激损伤的保护作用

摘要

目的：1.在Aβ诱导的星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的氧化应激损伤模型中，初步探讨Nrf2对Aβ诱导的氧化应激的抑制作用及DMF对Nrf2及其下游抗氧化应激因子如Nqo1和HO-1的调节作用。2.通过对星形胶质细胞Keap1、HDAC2因子和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞Keap1、CX3CL1因子的检测，初步探讨DMF在Aβ诱导的氧化应激条件下对Nrf2作用机制。
　　方法：1.将大鼠星形胶质细胞和人神经母细胞瘤 SH-SY5Y细胞分别与Aβ25-35共培养，诱导氧化应激反应。在大鼠星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中分别设立 Aβ组、Aβ+DMF组、Aβ+Si-nrf2组和 Aβ+Si-nrf2+DMF组。Aβ组细胞给予 Nrf2-conRNA转染。Aβ+Si-nrf2组细胞给予Nrf2-siRNA转染以敲低Nrf2基因的表达。以DMF（4uM）分别对Aβ组、Aβ+Si-nrf2两组细胞进行干预，干预后的细胞分别为Aβ+DMF组、Aβ+Si-nrf2+DMF组。然后采用RT-PCR分别检测两种细胞中各Aβ组、Aβ+DMF组、Aβ+Si-nrf2组和Aβ+Si-nrf2+DMF组的Nrf2、Nqo1、HO-1的mRNA表达水平。2.采用RT-PCR检测星形胶质细胞和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞各Aβ组、Aβ+DMF组、Aβ+Si-nrf2组和Aβ+ Si-nrf2+DMF组的Keap1 mRNA表达水平。采用Western blot检测星形胶质细胞各组的HDAC2蛋白表达水平和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞各组的CX3CL1蛋白表达水平。
　　结果：1.在星形胶质细胞和人神经母细胞瘤 SH-SY5Y细胞中，Aβ+Si-nrf2组较Aβ组、Aβ+Si-nrf2+DMF组较Aβ+DMF组Nrf2、Nqo1和HO-1 mRNA表达水平显著降低（P<0.05）。Aβ+DMF组较Aβ组Nrf2、Nqo1和HO-1 mRNA表达显著升高（P<0.05）。2.在星形胶质细胞和人神经母细胞瘤 SH-SY5Y中， Aβ+DMF组较Aβ组、Aβ+Si-nrf2+DMF组较Aβ+Si-nrf2组Keap1 mRNA表达显著降低（P<0.05）。在星形胶质细胞中，Aβ+DMF组较Aβ组、Aβ+Si-nrf2+DMF组较Aβ+Si-nrf2组的HDAC2蛋白表达水平均明显下降（P<0.05）。在人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中，Aβ+DMF组较Aβ组、Aβ+Si-nrf2+DMF组较Aβ+Si-nrf2组的CX3CL1蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。
　　结论：1.Nrf2对Aβ诱导的氧化应激具有抑制作用。在Aβ诱导氧化应激的条件下，DMF可提高Nrf2的表达，增加抗氧化应激因子的表达。2.DMF可能通过抑制HDAC2的表达，提高 Nrf2水平，从而减弱Aβ诱导的大鼠星形胶质细胞的氧化应激反应。DMF可能通过增加CX3CL1和减少Keap1的表达双重途径共同提高 Nrf2水平，从而减弱Aβ诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5H细胞的氧化应激反应。

目录

声明

缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

1.对象和方法

1.1主要仪器设备

1.2实验试剂

1.3实验方法

1.4统计学方法

2.结果

2.1 Aβ25-35诱导组与对照组OD值比较

2.2 Aβ组与Aβ+Si-nrf2组Nrf2蛋白表达比较

2.3 Nrf2、Nqo1、Ho-1和Keap1的mRNA表达

2.4 星形胶质细胞的HDAC2蛋白的表达

2.5 人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的CX3CL1蛋白的表达

3.讨论

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述: NRF2/ARE通路及其相关调节

致谢

个人简历