PLCε的缺陷延缓小鼠早期皮肤伤口愈合并减弱瘢痕形成

摘要

目的：
　　探究PLCε在皮肤伤口愈合过程中的作用，并研究其对伤口愈合速率和瘢痕形成起到哪些影响和其作用机制。
　　方法：
　　取8周大的PLCε敲除基因小鼠和对照组小鼠各18只，分为两组。分别对每一只小鼠背部做直径为3mm的圆形皮肤全层打洞创伤。
　　1.每天拍照记录各组中六只小鼠的伤口并使用游标卡尺测量伤口大小，直至完全愈合，以计算伤口愈合率。
　　2.在创伤后取创伤边缘组织制作石蜡切片，通过HE染色来对比创伤边缘处的炎性细胞的浸润情况。
　　3.利用PCNA染色试剂盒对创伤周围组织制成的切片进行染色，对其增殖情况进一步检测。
　　4.利用免疫染色，探究α-SMA、Col6、Col17等的表达情况。
　　5.使用人角质形成细胞（购买自Lifeline Cell Technology）并使用SiRNA技术敲掉PLCε基因，构建PLCεKO组角质形成细胞，行划痕实验，探究PLCε对角质形成细胞移行速率的影响。
　　结果：
　　1.WT小鼠和PLCεKO小鼠创伤愈合的总时间并无明显差异，而在第3、4、5天PLCεKO组小鼠的创伤愈合速率明显受到抑制。
　　2.两组小鼠上皮重建无明显差异，而浸润于伤口周围的炎细胞数目WT组明显多于PLCεKO组。
　　3.WT组和PLCεKO组小鼠创缘处细胞增殖没有差异。
　　4.PLCεKO组的瘢痕组织中Col6、Col17的表达明显少于WT组。
　　5.WT组角质细胞迁移率明显快于PLCεKO组。
　　结论：
　　1.PLCε具有促炎作用，IL-6、Cxcl-1、Cxcl-2、Ccl20等细胞因子为其下游因子受其调控。PLCεKO可使炎症反应减弱。
　　2.PLCε并不影响角质形成细胞的增殖，而是影响其的迁移速率。PLCεKO可使迁移速率减弱。
　　3.通过以上两点，PLCεKO延迟创伤愈合。
　　4.PLCεKO可明显减少瘢痕的形成。

目录

声明

缩略语

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

对象和方法

1.1 实验准备

1.2 实验方法

结果

2.1 小鼠伤口愈合速率

2.2 创伤后伤口细胞浸润情况

2.3 创伤后炎症因子表达情况

2.4 PLCε缺失对角质细胞增殖和移行的影响：

2.5 伤口愈合后瘢痕形成的情况

讨论

3.1 PLCε对创伤愈合的影响及其作用机制

3.2 利用创伤愈合模型探索PLCε下游因子及其对瘢痕形成的影响

3.3 存在的问题：

3.4 成果部分

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述:PLCε作用机制及其在炎症、肿瘤等疾病中的应用前景

致谢

个人简历