联合检测尿液中肿瘤标记物诊断膀胱癌的可行性研究

摘要

目的：
　　全球范围内，每年发生约38万例膀胱恶性肿瘤，而在中国，膀胱癌是最多见的泌尿系肿瘤。膀胱癌的发病初期诊断和术后进行随访主要采用膀胱镜检查术，但它价钱昂贵且是一个侵入性的手段；尿细胞学检测方便，无创，但灵敏度不是很高，这些缺陷限制了膀胱癌的早期诊断和治疗。此外，膀胱癌的高复发率特点使得术后复发的监测尤为重要，但目前仍缺乏相应手段，这些问题使得一种新的检测手段成为需求。人的体液以及组织中具有一些特异性的肿瘤标记物（Tumormakers），它们可以用来特异性的检测某种恶性疾病，正因为它们对某种恶性肿瘤具有特异性，故而临床上常常应用肿瘤标记物来诊断特定肿瘤，并可以为肿瘤的治疗及预后进行评估，是以肿瘤标志物逐渐得到广泛的关注，成为当前热门的研究方向。本研究主要通过ELISA的方法检测尿液中NMP22、CD44、CK20、CEACAM1和BTA五种肿瘤标记物在膀胱癌患者尿液中的表达情况，并探讨上述五种标记物不同组合在膀胱癌诊断中的临床意义,为后续开发更为有效的能同时检测多种肿瘤标记物的试剂盒提供理论依据。
　　方法：
　　选取了2015年12月至2016年6月期间因怀疑膀胱肿瘤收治于天津医科大学第二医院的患者，经膀胱镜活检或TURBT术后病理诊断为膀胱癌的64名患者纳入本研究，设为肿瘤组；并选取20名非泌尿系肿瘤的患者作为对照组。应用酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay）分别检测两组患者尿液样本中NMP22、CD44、CK20、CEACAM1和BTA的表达水平，通过吖啶橙法（AO-F）行尿脱落细胞检查。应用SPSS19.0软件绘制受试者工作曲线（ROC），使用约登指数（Youden index）来计算5种肿瘤标记物的临界值（Cutoff），从而比较这五种肿瘤标记物以及不同组合联合诊断膀胱癌的准确性。应用秩和检验或费氏确切概率法分析五种肿瘤标记物与患者临床病理特征之间的关系。
　　结果：
　　1、NMP22、CD44、CK20、CEACAM1和BTA五种肿瘤标记物在肿瘤组的浓度显著高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
　　2、NMP22、BTA、CK20、CD44、CEACAM1的曲线下面积（AUC）分别为0.752、0.820、0.773、0.859、0.724，由此可见这几种种标记物比较，NMP22检测膀胱癌的阳性率最高，达到84.3%，但特异度却很低，仅为55%。而尿脱落细胞AO-F法检测膀胱癌的特异度最高为100%，但它检测膀胱癌的阳性率却是6种肿瘤标记物中最低的，仅为60.9%。依据AUC比较，CD44的检测价值最大，当CD44取cutoff值为348.8pg/ml时，其敏感度可达82.8%，特异度为85%。
　　3、尿脱落细胞AO-F法对于低分级尿路上皮癌的检测敏感度很低，仅为40%，而在高级别膀胱癌中的诊断敏感度为70.5%，两者有统计学差异（p=0.028）。尿AO-F法和CEACAM1检测膀胱癌的敏感度随肿瘤分期升高而逐渐增加，但其他各项指标却没有发现这种趋势。
　　4、BTA、CD44、CK20三项联合检测时，敏感度为96.8%，特异度为80.0%。结论：
　　1、应用ELISA法检测尿液中NMP22、BTA、CK20、CD44、CEACAM1这5种肿瘤标志物对膀胱癌的诊断具有一定的临床意义。
　　2、应用1种标记物检测膀胱癌，CD44较其它4种标记物的价值最大
　　3、CEACAM1对高分期膀胱癌的敏感度更高，尿脱落细胞AO-F检测对高分期、高分级膀胱癌的检测敏感度更高。
　　4、CD44、CK20、BTA三者联合对膀胱癌的检测具有较高的临床意义。

目录

声明

缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的

研究方法

1.1对象和方法

1.1.1 研究对象

1.1.2 研究方法

1.1.3 样本检测

1.1.4 统计学方法

1.2结果

1.2.1 两组基本临床资料比较

1.2.2 肿瘤组、对照组5种标志物表达水平比较

1.2.3 各标记物 ROC 曲线意义

1.2.4 不同病理分期患者尿中各标记物敏感度比较

1.2.5 不同病理分级患者尿中各标记物比较

1.2.6 膀胱癌原发复发患者各标记物比较

1.2.7 不同标记物组合联合检测膀胱癌比较

1.3讨论

1.3.1 膀胱癌的研究现状

1.3.2 核基质蛋白22(NMP22)

1.3.3 膀胱肿瘤抗原(BTA)

1.3.4 细胞角蛋白CK20

1.3.5 CD44

1.3.6 癌胚抗原相关细胞黏附分子（ CEACAM1）

1.3.7 尿脱落细胞

1.3.8 各标记物在不同病理分期、分级以及原发复发膀胱癌中敏感度比较

1.3.9 肿瘤标记物的联合检测

1.4 局限性

1.5 小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述:膀胱癌尿瘤标记物及其联合检测的研究新进展

致谢

个人简历