冠醚及环糊精类手性选择剂在毛细管电泳法拆分手性药物中的应用

摘要

手性药物在生理活性、体内代谢和分布及毒性等方面存在的差异越来越被人们所重视,手性药物拆分已成为医药开发与研究领域中的重要组成部分.毛细管电泳技术在手性分离中具有其独特的优势.高灵敏的毛细管电泳手性拆分技术可用于药物中对映体纯度的监测,食品和环境科学中痕量手性农药和污染物的分析以及复杂生物样品(如尿样、血样、体液、组织和细胞等)的分析,因此成为当前最为流行的手性毛细管电泳技术之一.虽然在线和离线样品预处理技术和检测系统的改进均可进行灵敏手性拆分,但最为简便、经济的方法仍是柱上样品富集技术.自1997年起,仅有10篇文献报道了等速电泳(ITP),电堆积(stacking),FASS,二元电堆积(dual stacking)和电扫积(sweeping)等柱上样品富集技术与手性拆分相结合.瞬时等速电泳(t-ITP)是众多在线富集技术中最为有效的技术之一,但至今尚未有人成功将其用于灵敏手性拆分. 本试验把t-ITP技术用于手性冠醚的拆分体系,成功拆分了高盐样品基质中新型氟化喹林酮类抗生素,Gemifloxacin,并使其对映体有效地进行了在线富集. 此外,实验中还使用了β-环糊精(β-CD),羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD),甲基-β-环糊精(M-β-CD),羧甲基-β-环糊精(CM-β-CD)和磺化-β-环糊精(Sulfated β-CD)对5种新型二氢吡啶类钙离子拮抗剂(DHP)进行了手性拆分研究. 十九世纪二十年代起,聚合环糊精类的手性选择剂逐渐吸引人们的注意.聚合物骨架和环糊精之间的空间臂可以防止环糊精空腔的立体位阻效应；聚合物骨架上的电荷增大了手性选择剂和对映体之间的静电作用引力；高分子质量减小了对映体的有效迁移.因此,在实际应用中具有更好的对映选择性.本实验中利用烯丙基缩水甘油醚的开环反应,在β-环糊精引入具有共聚官能团的空间臂,用丙烯酰胺代替丙烯胺与新型衍生化的β-环糊精单体成功进行了共聚反应,得到了具有很好拆分效果的环糊精类共聚物手性选择剂,并在电泳实验中证明了其具有一定的拆分效果.

目录

文摘

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第一章导论

1.1引言

1.2手性与手性药物

1.2.1手性

1.2.2手性与手性药物的活性关系以及药代动力学和药效学特征

1.2.3手性药物政策与市场情况

1.3手性识别机理

1.3.1三点相互作用模型

1.3.2分子间相互作用力

1.4手性选择剂

1.4.1手性冠醚

1.4.2环糊精

1.4.3合成聚合物

1.4.4蛋白质

1.4.5多糖类化合物

1.4.6分子印记聚合物(MIPs)

1.4.7大环抗生素

1.4.8金鸡纳树生物碱

1.4.9离子络合物

1.5毛细管电泳

1.5.1概述

1.5.2电渗流

1.5.3分离模式

1.6毛细管电泳在手性拆分中的应用

1.6.1电动色谱(EKC)

1.6.2毛细管电色谱(CEC)

1.6.3非水电泳(NACE)

1.6.4毛细管凝胶电泳(CE)

1.7毛细管电泳中提高检测灵敏度的方法

1.7.1物理方法

1.7.2化学方法

1.8高灵敏手性拆分

1.8.1在线和离线样品预处理

1.8.2在线柱上样品富集技术

1.8.3更换检测系统

第二章t-ITP体系中以冠醚为手性选择剂拆分抗生素Gemifloxacin

2.1引言

2.2实验部分

2.2.1试剂

2.2.2仪器

2.2.3缓冲液及样品的制备

2.2.4实验过程

2.3结果与讨论

2.3.1 Gemifloxacin的物理化学性质及其紫外吸收光谱

2.3.2高盐基质中Gemifloxacin的瞬时等速电泳

2.3.3 CZE体系中以冠醚为手性选择剂拆分Gemifloxacin

2.3.4t-ITP体系中以冠醚为手性选择剂拆分高盐基质中Gemifloxacin

2.4结论

第三章环糊精类手性选择剂拆分二氢吡啶类药物

3.1引言

3.2实验部分

3.2.1 试剂

3.2.2仪器

3.2.3缓冲液及样品的制备

3.3结果与讨论

3.3.1环糊精手性选择剂类型对拆分的影响

3.3.2 HP-β-CD浓度对分离度的影响

3.3.3缓冲液pH值对分离度的影响

3.3.4分离电压对分离度的影响

3.4结论

第四章新型手性选择剂丙烯酰胺-β-环糊精共聚物的合成及应用

4.1引言

4.2实验部分

4.2.1试剂

4.2.2仪器

4.3合成丙烯酰胺-β-环糊精共聚物(acrylamide-β-CD copolymer)

4.4丙烯酰胺-β-环糊精共聚物在手性拆分中的应用

4.4.1缓冲液及样品的制备

4.4.2实验过程

4.4.3结果与讨论

4.5结论

参考文献

发表论文和科研情况说明

致谢