延胡索生物碱提取纯化工艺的研究

摘要

延胡索药用价值高，临床应用广泛。其有效部位为生物碱，其中以延胡索乙素的药效最为明显。为得到操作简便、适合工业化生产的延胡索提取和纯化工艺，本文研究了延胡索生物碱的提取、纯化过程，并对各个工艺进行优化。主要工作如下：
　　 1.提取工艺研究
　　 以延胡索乙素提取率为评价指标，考虑到工业化生产的可行性，对渗漉法、煎煮法、醇回流提取法进行比较，最终确定了采用醇回流提取法，利用正交设计对醇回流提取法进行优化。优化结果为：取延胡索药材加入2倍量酸水(pH=4的盐酸水溶液)浸泡过夜，次日加入6倍量70％乙醇，加热回流提取2h，滤过。药材滤渣再加入6倍量的70％乙醇，加热回流提取2h，滤过，合并两次滤液即可。此工艺下，延胡索乙素提取率为86.99％。
　　 2.纯化工艺研究
　　 首先，通过静态试验，从6种不同性质的树脂中筛选出两种树脂，然后进行动态试验，确定了AB-8为适宜的树脂。通过对AB-8树脂进行静态吸附试验，结果表明它对延胡索乙素的吸附符合Langmuir方程，吸附动力学符合准二级动力学吸附模型。为树脂纯化工艺的确定提供了理论基础。然后，通过研究动态试验的影响因素，对AB-8树脂纯化延胡索粗提液工艺进行优化。结果为：延胡索粗提液减压浓缩至无醇味，加水稀释到浓度为0.5g生药／mL药液，室温下湿法装柱，径高比1:8，上样量为3BV，控制流速15BV／h，上样完成后静置饱和0.5h，用6BV水冲洗除杂，再用70％乙醇溶液12BV体积以15BV／h的流速进行洗脱。纯化后，延胡索乙素得率为81.60％，延胡索乙素纯度可达到2.69％。
　　 3.指纹图谱研究
　　 利用液质联用检测方法，初步建立了延胡索的指纹图谱，并进行方法学考察，结果表明该方法精密度和重现性良好、供试品在12h内稳定。应用此法，考察各供试品指纹图谱，为延胡索质量的控制提供了可行的方法。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一章 文献综述

1.1延胡索的来源及化学成分

1.1.1延胡索的来源

1.1.2延胡索的化学成分

1.2延胡索的药理作用及临床应用

1.3延胡索生物碱提取纯化工艺研究

1.3.1延胡索中生物碱的提取方法

1.3.2影响提取率的因素

1.3.3延胡索中生物碱的纯化方法

1.4延胡索质量分析测定方法

1.4.1延胡索乙素含量测定方法

1.4.2应用液质联用技术建立指纹图谱

1.5本课题主要研究内容和意义

第二章 延胡索乙素的含量测定方法

2.1实验仪器与材料

2.1.1实验仪器

2.1.2实验试剂与药品

2.2实验方法

2.2.1色谱条件

2.2.2对照品溶液的制备

2.2.3供试品溶液的制备

2.2.4线性试验

2.2.5精密度试验

2.2.6稳定性试验

2.2.7重现性试验

2.2.8回收率试验

2.2.9样品含量测定

2.3结果与讨论

2.3.1线性试验结果

2.3.2精密度试验结果

2.3.3稳定性试验结果

2.3.4重现性试验结果

2.3.5回收率试验结果

2.3.6样品含量测定结果

2.4本章小结

第三章 延胡索生物碱提取工艺的优化

3.1实验仪器与材料

3.1.1实验仪器

3.1.2实验试剂与药品

3.2实验方法

3.2.1延胡索药材中延胡索乙素的测定方法

3.2.2不同提取方法的筛选

3.2.3正交设计优化提取工艺

3.3结果与讨论

3.3.1延胡索药材中延胡索乙素的测定结果

3.3.2不同提取方法的筛选结果

3.3.3正交设计对提取工艺优化结果

3.4本章小结

第四章 树脂的筛选

4.1实验仪器与材料

4.1.1实验仪器

4.1.2实验试剂与药品

4.2实验方法

4.2.1树脂的预处理

4.2.2树脂的筛选

4.3结果与讨论

4.3.1静态吸附与解吸试验筛选树脂结果

4.3.2动态吸附与解吸试验筛选树脂结果

4.4本章小结

第五章 树脂纯化延胡索提取液工艺的优化

5.1实验仪器与材料

5.1.1实验仪器

5.1.2实验试剂与药品

5.2试验方法

5.2.1 AB-8树脂对延胡索乙素静态吸附与解吸性能的考察

5.2.2 AB-8树脂对延胡索乙素动态吸附与洗脱工艺的优化

5.3结果与讨论

5.3.1 AB-8树脂对延胡索乙素静态吸附与解吸性能的考察结果

5.3.2 AB-8树脂对延胡索乙素动态吸附与洗脱工艺的优化结果

5.4本章小结

第六章 延胡索指纹图谱的初步建立

6.1实验仪器与材料

6.1.1实验仪器

6.1.2实验试剂与药品

6.2实验方法

6.2.1对照品溶液的制备

6.2.2供试品溶液的制备

6.2.3流动相洗脱梯度的考察

6.2.4检测波长的选择

6.2.5进样浓度的考察

6.2.6进样量的考察

6.2.7方法学考察

6.2.8供试品指纹图谱的建立

6.3结果与讨论

6.3.1流动相洗脱梯度的确定

6.3.2对照品的色谱图

6.3.3检测波长的确定

6.3.4进样浓度的确定

6.3.5进样量的确定

6.3.6方法学考察结果

6.3.7供试品溶液的指纹图谱分析

6.4本章小结

第七章 结论与展望

7.1结论

7.2展望

参考文献

致谢