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基于毛细管电泳技术对蛋白质混合样品中低丰度组分的分离

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第1章 文献综述

1.1蛋白质分离

1.2毛细管管壁修饰

1.3毛细管电泳拉伸速差分离模式

1.4本论文主要研究内容

第2章 毛细管管壁修饰

2.1引言

2.2实验仪器及材料

2.3仪器和方法

2.4实验结果与讨论

2.5本章小结

第3章 毛细管电泳拉伸速差模式方法的验证

3.1引言

3.2实验仪器及材料

3.3仪器和方法

3.4实验结果与讨论

3.5本章小结

第4章 毛细管电泳拉伸速差模式分离蛋白质

4.1引言

4.2实验仪器及材料

4.3仪器和方法

4.4实验结果与讨论

4.5本章小结

第5章 结论与展望

参考文献

发表论文情况说明

致谢

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摘要

在现在研究阶段,蛋白质难以检测的一个重要原因就是血清中蛋白质浓度相差迥异,高丰度蛋白很容易掩盖低丰度蛋白,造成低丰度蛋白检测困难。所以,蛋白质浓缩富集成为有效分析复杂样品的一个重要办法。 富集浓缩样品时常常伴随着复合物中高丰度蛋白质的过载,这将由于严重的纵向分散导致整个分离情况变的糟糕。在这里,我们提出了一种基于改进毛细管电泳解决这个问题的策略,即拉伸速差模式毛细管电泳。过载样品首先在更高的电场强度下拉伸到更宽的区域,然后通过“切割”将样品分馏成“薄片”,由于较小的纵向分散,可以使这些“薄片”样品实现基线分离。 在实验中,为了使该方法不受其他因素的影响,首先对毛细管内壁进行涂覆,避免电渗流及样品吸附造成的重现性差、实验不稳定。 在本方法中,我们通过分离N,N'-二苯基胍和N,N'-二(邻甲苯基)胍的过量混合物来证实新方法的可行性,并与传统的毛细管电泳方法进行对比;此后,通过从高丰度蛋白质中分离低丰度蛋白质来证明新方法的实用性。

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