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第一章 引言
第一节 人类8型疱疹病毒(HHV-8)概述
1.1.1 HHV-8/HHV-8的流行病学
1.1.2 HHV-8的结构及其基因组的特征
第二节 人类8型疱疹病毒的基因表达
1.2.1 HHV-8在感染细胞中经历潜伏和裂解周期
1.2.2 HHV-8潜伏期的基因表达
1.2.3 HHV-8裂解基因的表达
第三节 复制与转录激活蛋白调控HHV-8从潜伏到裂解的转换
1.3.1 ORF50/RTA蛋白简介
1.3.2 ORF50/RTA蛋白活性的调节
1.3.3 ORF50/RTA表达的调节
1.3.4 RTA激活下游靶基因表达的机制
1.3.5 RTA直接参与病毒DNA复制
1.3.6 阻断RTA表达和活性成为治疗HHV-8感染性疾病的新靶标
第四节 影响HHV-8从潜伏向裂解周期转换的重要早期蛋白
1.4.1 K8/K-bZIP蛋白
1.4.2 ORF57/Mta蛋白
第五节 干扰素调节因子7是宿主抗病毒防御反应的关键调节因子
1.5.1 干扰素
1.5.2 干扰素调节因子
1.5.3 干扰素调节因子7
1.5.4 IRF-7是宿主免疫防御反应的关键调节因子
第六节 本文的立论依据
1.6.1 HHV-8 RTA蛋白调控ORF57基因表达机制的研究现状
1.6.2 IRF-7抑制RTA对ORF57启动子的激活
1.6.3 本文的目的及意义
第二章 材料和方法
第一节 实验材料
2.1.1 细胞
2.1.2 菌株
2.1.3 质粒
2.1.4 引物
2.1.5 试剂
2.1.6 软件
第二节 实验方法
2.2.1 PCR扩增目的DNA片段
2.2.2 质粒的提取
2.2.3 DNA的酶切及连接反应
2.2.4 接头的磷酸化
2.2.5 载体的去磷酸化
2.2.6 细胞的培养与转染
2.2.7 蛋白免疫印迹实验
2.2.8 Native-page分离非变性蛋白及检测
第三章 结果与分析
第一节 S系列报告质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答
3.1.1 质粒S1的构建
3.1.2 质粒S2的构建
3.1.3 质粒S3的构建
3.1.4 质粒S4的构建
3.1.5 质粒S5的构建
3.1.6 质粒S6的构建
3.1.7 S系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答
第二节 L系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答
3.2.1 质粒L1的构建
3.2.2 质粒L2的构建
3.2.3 质粒L3的构建
3.2.4 质粒L4的构建
3.2.5 质粒L5的构建
3.2.6 L系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答
第三节 C系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答
3.3.1 质粒C1的构建
3.3.2 质粒C2的构建:
3.3.3 质粒C3的构建
3.3.4 质粒C4的构建
3.3.5 质粒C5的构建
3.3.6 质粒C6的构建
3.3.7 质粒C7的构建
3.3.8 质粒C8的构建
3.3.9 C系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答
第四节 Native-page检测IRF-7的多聚化
第四章 讨论
4.1 RTA激活ORF57基因是HHV-8裂解复制中的关键环节
4.2 ORF57启动子中的多个RRE共同介导RTA的激活
4.3 IRF-7能通过结合RRE2抑制RTA对上游和下游RRE的激活
4.4 应答元件的数目和元件间的距离影响RTA激活和IRF-7抑制的效果
4.5 IRF-7存在多聚化形式
4.6 展望
第五章 结论
参考文献
致射
附录1 个人简历
附录2 在学期间发表的论文
附录3 缩略语一览表