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玉米非特异性转脂蛋白与钙调素结合作用力的研究

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摘要

Ca2+/CaM信号通路是生物体内信号转递系统中极其重要的组成部分,其诸多的调节功能都是通过与钙调素结合蛋白(CaMBPs)的相互作用而实现的。因此,对钙调素结合蛋白的研究在信号转导领域有着重要的意义。本实验室从白菜中分离出一种新的钙调素结合蛋白(CaMBP-10),并证明其为植物非特异性转脂蛋白(nsLTP)的家族成员。近期的研究表明,nsLTPs与钙调素的结合具有普遍性,这为证明CaM参与植物转脂蛋白的调节提供了直接的证据。
   为了进一步明确转脂蛋白和CaM的结合方式和分子之间的相互作用,本文选用玉米非特异型转脂蛋白(Zm-nsLTP),通过CaM凝胶覆盖(CaM-gel overlay)分析、CaM-Sepharose下拉(Pull-down)实验证明了Zm-nsLTP为一类钙不依赖性钙调素结合蛋白,通过静电引力与钙调素结合。并利用荧光滴定法测定其和钙调素的表观解离常数;通过凝胶过滤法获得Zm-nsLTP-CaM复合物。另一方面,总结归纳了nsLTP与钙调素结合的一般规律。这些都为进一步研究转脂蛋白与CaM的相互作用提供了条件。图30幅,表6个,参考文献77篇。

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