GA6与SHP2蛋白在肝细胞癌中的临床意义及其作用机制的研究

摘要

第一部分 GA6蛋白在肝细胞癌中的临床意义及其致癌机制的研究
　　 1、实验目的：研究GA6(Hematopoietic PBX-interacting protein)蛋白在肝细胞癌中表达的临床意义及其在肝细胞癌中的致癌作用的分子生物学机制。
　　 2、研究方法：纳入2000年至2007年在中国人民解放军总医院行手术治疗的肝细胞癌(HCC)标本328例(均包括肿瘤组织T及相应的癌旁非肿瘤组织NT)。构建组织芯片，通过免疫组化染色分析GA6的表达与临床特征的相关性及其与预后的关系；纳入新鲜HCC标本49例(均含肿瘤组织及对应癌旁非肿瘤组织)并通过Western blot检测GA6蛋白的表达；在肝癌细胞系中，通过GA6的过表达及干扰技术，进行生长曲线、平板克隆形成、软琼脂克隆形成、细胞周期测定及裸鼠移植瘤等实验，研究GA6蛋白对肝癌细胞生长、增殖能力的影响。
　　 3、研究结果：(1)免疫组化显示HCC肿瘤组织GA6蛋白的表达明显高于癌旁组织(T：1.39±0.63，NT：0.92±0.57，P<0.0014：肿瘤组织阳性率94.5％(310/328)，癌旁组织阳性率85.4%(280/328，P<0.001)。肿瘤组织中GA6的表达与HCC各临床指标之间均无相关性，生存分析示GA6的表达与HCC患者预后无关(P=0.687)。(2)在肝癌细胞系中通过GA6的过表达及干扰技术，生长曲线实验、克隆形成实验、裸鼠移植瘤实验均显示，GA6可促进肝癌细胞生长和增殖；细胞周期及相关蛋白的表达测定显示，GA6可影响细胞周期调节蛋白的表达，使大量细胞通过G2/M期检测点，进入M期分裂，从而促进肿瘤细胞增殖。
　　 4、结论：体内与体外研究显示，GA6可促进肝癌细胞的生长与增殖；免疫组化显示，HCC肿瘤组织中GA6蛋白的表达明显高于癌旁组织，但与患者预后无关。GA6在肝细胞癌中的作用仍有待进一步研究。