胚胎干细胞移植恢复减数分裂和雄性生殖功能的研究

摘要

近年来，随着广大男性生活压力和心理压力的日益增大，男性的精子在质量和数量上都会受到不同程度的影响，从而导致不育症患者的人数逐年递增。同时环境污染和癌症治疗等对生殖系统和生殖细胞的破坏，使得人类的生殖健康和生育能力日益遭受威胁。减少不孕不育人口的数量已经成为许多卫生组织的首要任务之一。
　　生精功能障碍主要表现为精子数目的减少和精子活力的降低。研究表明，随着男性年龄的增长，体内活性自由基的过度累积会引起细胞和组织损伤，尤其是精子特别容易受到活性氧的损伤。过量的活性氧积累能够破坏精子的膜结构，增加膜的渗透性，降低细胞内酶的活性，损伤DNA结构，加速细胞凋亡，从而使得精子活性降低，运动功能减退，最终导致不育。
　　人们试图通过精原干细胞移植、睾丸组织移植、甚至是体外诱导胚胎干细胞向生殖细胞分化等方法来治疗和重建男性生殖系统，达到恢复男性生殖功能的目的。本实验利用白消安预处理KM公鼠，鉴定胚胎干细胞移植技术对睾丸曲细精管内的精子发生作用。研究结果表明，胚胎干细胞移植后，睾丸的形态、体积和重量接近正常公鼠，睾丸内EGF基因表达量显著提高。曲细精管内VASA、PCNA、SCP3阳性细胞明显增多，这标志着睾丸曲细精管内生殖细胞的形成、增殖和分化。实验结果超出预想并为人惊叹，通过胚胎干细胞移植技术能够刺激产生受体自身来源的活性精子，并得到真正意义上自己的后代，这为男性不育的临床治疗提供了一定依据，在生殖医学领域具有很大的应用价值。

目录

声明

摘要

第一章 前言

第一节 生殖健康与男性不育症

1．1．1 引起男性不育症的外在原因和内在机制

1．1．2 男性不育症的治疗现状和前景

第二节 胚胎干细胞与生殖医学

1．2．1 胚胎干细胞诱导分化形成雄性生殖细胞的研究进展

1．2．2 胚胎干细胞在生殖医学研究中的意义

第二章 白消安预处理致使公鼠丧失生殖功能

第一节 导言

第二节 实验材料和方法

2．2．1 实验动物

2．2．2 实验仪器与试剂

2．2．3 实验方法

第三节 实验结果

第四节 讨论

第三章 RA体外诱导胚胎干细胞和孤雌胚胎干细胞向生殖细胞的分化

第一节 导言

第二节 实验材料和方法

3．2．1 实验材料

3．2．2 实验方法

第三节 实验结果

第四节 讨论

第四章 胚胎干细胞、孤雌胚胎干细胞和RA诱导的生殖细胞移植

第一节 导言

第二节 实验材料和方法

4．2．1 细胞系

4．2．2 实验仪器与试剂

4．2．3 实验方法

第三节 实验结果

第四节 讨论

第五章 胚胎干细胞、孤雌胚胎干细胞和RA诱导的生殖细胞移植恢复减数分裂和小鼠生殖功能的鉴定

第一节 导言

第二节 实验材料和方法

5．2．1 实验动物

5．2．2 实验仪器与试剂

5．2．3 实验方法

第三节 实验结果

5．3．1 自然生产后代数目统计、后代基因型鉴定、后代生殖能力检测

5．3．2 精子数目统计、精子活力检测和睾丸重量比较

5．3．3 有丝分裂、减数分裂和生殖系marker检测

5．3．4 生长因子基因表达检测

第四节 讨论

第六章 结论

参考文献

致谢

个人简历