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脑心通抑制db/db小鼠糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病的发展

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第一章 引言

第一节 糖尿病概述

第二节 糖尿病分类与诊断

1.2.1 1型糖尿病

1.2.2 2型糖尿病

1.2.3 其他特殊类型糖尿病

1.2.4 妊娠期糖尿病

1.2.5 糖尿病诊断

第三节 糖尿病并发症

1.3.1糖尿病视网膜病变

1.3.2糖尿病肾病

第四节 脑心通

1.4.1 脑心通简介

1.4.2 脑心通的临床研究

1.4.2 脑心通与糖尿病并发症

第五节 选题依据

第二章 实验材料与方法

第一节 实验材料、试剂与仪器

2.1.1实验材料

2.1.2实验试剂

2.1.3实验仪器

第二节 实验方法

2.2.1动物喂养

2.2.2血糖水平测定

2.2.3血脂成分分析

2.2.4冰冻切片制备

2.2.5视网膜血管铺片

2.2.6免疫荧光染色

2.2.7 HE染色

2.2.8 PAS染色

2.2.9 油红O染色

2.2.10 实时荧光定量RT-PCR (Real time RT-PCR)

2.2.11蛋白质免疫印迹(Western blot)

2.2.12 数据分析

第三章 实验结果与讨论

第一节 脑心通改善db/db小鼠肥胖发展、血糖和血脂水平

3.1.1 脑心通减缓db/db小鼠肥胖的发展

3.1.2脑心通缓解db/db小鼠高血糖症

3.1.3 脑心通改善db/db小鼠血脂水平

第二节 脑心通抑制db/db小鼠糖尿病视网膜病变的发展

3.2.1 脑心通改善db/db小鼠视网膜血管异常

3.2.2 脑心通维持db/db小鼠视网膜结构完整性

3.2.3 脑心通下调db/db小鼠视网膜中Cas-3、MMP-2、MMP-9和TNF-α的表达

第三节 脑心通抑制db/db小鼠糖尿病肾病的发展

第四节 脑心通抑制糖尿病并发症发展的机制研究

第五节 讨论

第四章 结论

参考文献

致谢

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摘要

脑心通是中药标准化的产品,由16味中国传统药用植物打成超微粉按一定比例制成,广泛用于心脑血管疾病的治疗。微血管病变的发生在糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病发展过程中起着重要作用。虽然脑心通对血管有保护作用,但目前还不清楚脑心通能否抑制上述糖尿病综合症的发生。在本研究中,我们研究了脑心通对糖尿病小鼠的糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病的发展的影响。
  将糖尿病动物模型db/db小鼠(~6周龄)随机分为两组(10只/组),分别喂食普通食物或含脑心通的食物,实验过程持续14周。在治疗过程中,每月测定小鼠空腹血糖水平,每四天对小鼠体重进行测量。治疗过程结束后,收集小鼠血液和组织标本,对血清脂质水平、组织结构进行检测,并对相关机制展开了研究。
  研究结果表明,脑心通喂食减少db/db小鼠的体重增加,降低其空腹血糖水平与血清胆固醇水平。在视网膜中,脑心通能阻止整个视网膜和视网膜子层的收缩,抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9和肿瘤坏死因子α的表达,无细胞毛细血管形成以及大分子碳水化合物的积累。同时,脑心通能够抑制肾小球系膜扩张,纤连蛋白和晚期糖基化终末产物在肾脏中的表达,进而改善肾功能。在分子机制上的研究表明,脑心通能诱导肝脏和其他周围的组织中葡萄糖激酶、胰岛素受体底物1、成纤维细胞生长因子21的表达。
  综上所述,我们的研究表明,脑心通可以通过改善葡萄糖代谢抑制糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病的发展,提示了脑心通在临床上的潜在应用。

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