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四种小麦生产品种(系)抗条锈性鉴定及抗条锈基因的SSR遗传多样性分析

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摘要

1 绪论

1.1 引言

1.2 小麦条锈病的研究概况

1.2.1 小麦条锈病病害症状

1.2.2 小麦条锈病的病原菌

1.3 锈菌的培养

1.4 麦类锈菌的接种方法

1.4.1 注射接种

1.4.2 苗期叶面接种

1.5 小麦抗条锈性的研究

1.5.1 全生育期抗条锈性

1.5.2 成株期抗条锈性

1.5.3 持久抗条锈性

1.5.4 高温敏抗病性

1.6 分子标记在小麦抗条锈性方面的研究应用

1.6.1 RFLP标记技术

1.6.2 RADP标记技术

1.6.3 AFLP标记技术

1.6.4 ISSR标记技术

1.6.5 STS标记技术

1.6.6 SSR标记

1.7 本研究的目的及意义

1.8 主要研究内容和技术路线

2 抗性鉴定

2.1 田间抗性鉴定

2.1.1 试验材料

2.1.2 试验地设计

2.1.3 调查方法

2.1.4 计算方法

2.2 苗期抗性鉴定

2.2.1 实验材料

2.2.2 实验设计

2.2.3 调查方法

2.3 结果分析

2.4 因素相关性分析

3 SSR遗传多样性分析

3.1 实验材料

3.2 实验主要的设备和仪器

3.3 实验所需试剂

3.4 实验方法

3.4.1 黄化苗培养

3.4.2 小麦DNA的提取

3.4.3 模板DNA纯度与浓度检测

3.4.4 PCR反应体系和扩增

3.4.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳

3.4.6 电泳胶染色程序

3.4.7 SSR实验数据处理与分析

3.5 结果分析

3.5.1 抗锈品种DNA提取结果

3.5.2 引物筛选

3.5.3 SSR标记的多态性

3.5.4 SSR标记揭示品种间的遗传距离

3.5.5 SSR遗传揭示供试品种(系)间的遗传关系

4 讨论

4.1 抗性鉴定

4.2 四川小麦生产抗病品种SSR遗传多样性分析

结论

致谢

参考文献

附录

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摘要

小麦条锈病是危害小麦生产的主要病害之一,四川盆地是条锈菌源重要的冬繁区之一,冬繁菌源可随气流传到重庆、湖北及云南,贵州等地区,在四川种植抗性较好的品种对小麦条锈菌源量的传播起到一定的控制作用。虽然四川小麦品种繁多,但大部分是以繁6为抗源的品种,遗传范围较窄,随着新毒性小种的频繁出现,一般品种种植几年就容易失去抗性。
  本试验通过大田高感品种自然诱发及实验室苗期接种对115个四川小麦生产品种(系)分别进行成株期及苗期抗条锈性鉴定,并对大田成株期抗病品种进行SSR遗传多样性分析,结果显示:
  1、经大田高感品种(铭贤169)自然诱发成株期鉴定得出:115份材料中20个品种对当前流行的条锈菌生理小种表现免疫,占参试品种的17.4%;15个品种表现近免疫,占参数品种的13.04%;13份品种对当前流行的条锈菌生理小种表现极高的抗性,占参试品种的11.30%;4份材料表现中抗,占参试品种的3.5%;37份材料对当前流行的条锈菌生理小种表现较弱的抗性,占参试品种的32.18%;26份材料对当前流行的条锈菌生理小种具有极弱的抵抗力,占参试品种的22.61%。实验室苗期接种鉴定得出:8个品种免疫,占总参试品种的6.96%;21个品种表现出近免疫,占参试品种的18.26%;6个高抗品种,占参试品种的5.22%;33个中抗品种,占参试品种的28.70%;7个品种对当前流行的条锈菌生理小种抗性较弱,占参试6.08%;40个品种对当前流行的生理小种抗性较差,占参试品种的34.78%。
  2、对小麦基因组中46对SSR引物进行筛选,从中选择带型清晰,稳定、多态性丰富的11对引物对52份抗病材料进行遗传多样分析,11对SSR引物扩增出64个多态性位点,每对引物有1-10平均为4.5条,位点多态性指数PIC在0.75-0.90间,平均为0.83,多态性指数最大的引物是xwmc656、最小的是xbarc626。
  3、聚类分析显示:遗传相似系数于0.524-0.976间,平均为0.75,川07005与西科麦2号、渝03062与sw18155和内麦10号、内麦8号与川麦55遗传相似性最高,相似系数为0.976;川麦55与乐麦、331-60,sw2962与川育24、杏麦2号等相似系数最低,为0.524。经UPGMA聚类分析得出,52个抗病品种在0.524水平上可分为三大类,7个亚类,四川品种在DNA水平上遗传差异较小,遗传范围较窄。

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