PCR-EIA检测沙眼衣原体方法的建立和临床初步应用

摘要

选题目的在于建立高敏感性和高特异性的PCR-EIA方法检测沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)的感染.目前,泌尿生殖道沙眼衣原体感染是世界上最常见的性传播疾病之一,其诊断尚较缺少敏感特异,简便快速的实验室检测手段.为此作者在PCR基础上,在国内首 创了PCR-EIA方法来检测沙眼衣原体.PCR-EIA方法检测沙眼衣原体在临床上的初步应用,为了评价PCR-EIA法对泌尿生殖道标本中的沙眼衣原体的检测结果,作者用PCR-EIA法,乳胶免疫层析扩散法和培养法对359例STD门诊患者进行了平行检测比较.为进一步考察PR-EIA法能否应用于首段尿标本的沙眼衣 原体检测.作者用PCR-EIA法和免疫乳胶扩散法分别检测了29例STD门诊患者的首段尿标本和泌尿生殖道棉拭子标本.为了解孕妇中沙眼衣原体的感染情 况,作者用PCR-EIA法检测了221例孕妇的泌尿生殖道标本.此外,作者还用PCR-EIA法检测 了127例经培养法确证为淋球菌阳性的泌尿生殖道标本的沙眼衣原体的感染情况.

目录

第一部分PCR-EIA检测沙眼衣原体方法的建立

一、前言

二、材料及仪器设备

三、方法

四、结果

1 PCR引物的选择

2 样吕裂解液的确定

3 合适的UNG浓度

4 PCR扩增体系的摸索

5 合适的杂交反应

6 合适的EIA反应条件

8 PCR-EIA方法和PCR方法敏感性的比较和模板量与测定结果效应性分析

9 不同稀释度的PCR产物与EIA检测结果的关系

7 Ct内源性质粒阳性菌株的鉴定及灵敏度标本的制备

8 内部质控参比品的确定

9 阴、阳性判定临界值（Cutoff值）的确定

10 试剂盒的制备和检定

11 精密性试验

12 稳定性实验

五、讨论

参考文献

第二部分PCR-EIA检测沙眼衣原体方法的临床初步应用

一、前言

二、材料和方法

三、结果

四、讨论

参考文献

沙眼衣原体诊断技术进展

致谢