异喹啉生物碱衍生物的制备和抗肿瘤活性的研究

摘要

当今，癌症对人类的健康威胁越来越大，开发治疗肿瘤疾病的药物已成为当今研究的重要课题。异喹啉生物碱作为天然产物因其独特的结构在抗肿瘤方面显示了很强的活性，而且具有成本低、毒副作用小的优点，引起很多研究学者的关注。 在本研究课题中，用体外肿瘤细胞模型对川产药材厚朴中的N-降荷叶碱进行了抗肿瘤活性研究。为了寻找药理活性强、毒副作用小的抗肿瘤药物，并分析其活性基团，设计合成了2-乙酰-N-降荷叶碱、2,6-二乙酰-N-降荷叶碱和6-苯甲酰-N-降荷叶碱三个衍生物，后两个是未见报道的非天然产物。为了验证酰化反应是不破坏阿朴菲类异喹啉生物碱的环结构，选取了具有抗肿瘤活性的小檗碱进行还原和C-9位的酰化修饰，得到四氢小檗碱和9-乙酰小檗碱两个衍生物。用体外肿瘤细胞模型的方法对两个未见报道的异喹啉生物碱衍生物进行了抗肿瘤活性的筛选，并用DNA电泳和细胞染色等分子生物学方法对抗肿瘤机理进行研究。课题的研究结果显示，酰化反应的条件下不破坏异喹啉生物碱的母体结构的。得到的衍生物2,6-二乙酰-N-降荷叶碱比-N-降荷叶碱的抗肿瘤活性强，而衍生物6-苯甲酰-N-降荷叶碱的抗肿瘤活性降低。并且衍生物2,6-二乙酰-N-降荷叶碱的高剂量组(80μg/ml)诱导了肿瘤细胞的凋亡。 由此可知阿朴菲类异喹啉生物碱内N-位小分子基团结构引入能提高药物的抗肿瘤活性。这一结论为进一步分析异喹啉生物碱的抗肿瘤活性的构效关系提供了重要的实验依据，为此类化合物抗肿瘤活性的深入研究和新药开发提供了有益信息和研发思路。

目录

文摘

英文文摘

第1章绪论

1.1课题的研究背景及目的

1.1.1课题研究背景

1.1.2课题研究目的

1.2课题的研究内容及意义

1.2.1课题研究内容

1.2.2课题研究意义

1.3论文主要内容及组织

1.4综述

1.4.1 N-降荷叶碱的研究进展

1.4.2小檗碱碱的研究进展

1.4.3阿朴菲类异喹啉生物碱药理活性的研究

1.4.4原小檗碱类异喹啉生物碱药理活性的研究

第2章厚朴中N-降荷叶碱的纯化及其衍生物的制备

2.1前言

2.2实验路线的确立

2.3实验内容

2.3.1试验仪器及试剂

2.3.2 N-降荷叶碱的纯化

2.3.3 乙酰化物的制备

2.3.4苯甲酰氯化物的制备

2.4实验结果

2.4.1 N-降荷叶碱的试验数据

2.4.2化合物A的试验数据

2.4.3化合物B的试验数据

2.4.4化合物C的试验数据

2.5讨论

第3章小檗碱衍生物的制备

3.1前言

3.2实验路线的确立

3.3合成实验

3.3.1试验仪器及试剂

3.3.2小檗碱的还原反应

3.3.3乙酰小檗碱的制备

3.4实验结果

3.4.1 9-羟基小檗碱的试验数据

3.4.2化合物1的试验数据

3.4.3化合物2的试验数据

3.5讨论

第4章异喹啉生物碱及其衍生物抗肿瘤药理学研究

4.1前言

4.2实验路线的确立

4.3实验部分

4.3.1仪器和试剂

4.3.2肿瘤细胞培养

4.3.3 MTT实验

4.3.4 DNA抽提及电泳分析

4.3.5细胞微丝变化的分析研究

4.4实验结果

4.4.1细胞的形态学观察

4.4.2 MTT实验结果

4.4.3 DNA电泳实验结果

4.4.4细胞微丝染色的实验结果

4.5讨论

总结与展望

致谢

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的学术论文及科研成果