广金钱草中三种黄酮碳苷的制备与含量测定

摘要

广金钱草(Desmodium styracifolium(Osb.)Merr.)的药用名称源于《岭南草药志》，为豆科山蚂蝗属植物广金钱草的干燥地上部分。性微寒，味甘、淡，归膀胱、肝、胆、肾经，具有清热除湿、利尿通淋、排石之功效。主产于广东、广西、福建、湖南等省区，越南、印度、缅甸亦有分布，是两广地区大宗栽培的药材，民间用来治疗肾、肝、胆结石已有百余年历史，为我国常用的传统中药。
　　 现代药理研究表明，广金钱草中的黄酮类物质为其药理作用的主要化学成分，该类化合物能显著抑制血小板聚集，明显增加小鼠心肌营养性血流量，增加狗脑血流量及冠脉血流量，显著增强小鼠常压缺氧耐受力，缓解家兔离体血管条痉挛，对大鼠心肌急性缺血也有明显的保护作用。此外，还能预防草酸钙结石形成和复发、具有抗炎和益智等多种作用。而广金钱草中vicenin-1、夏佛塔苷(schaftoside)和vicenin-3这三种黄酮碳苷类成分含量较高，且尚未有同时测定该三种成分含量的文献报道，因此，本研究旨在建立用RP-HPLC同时测定vicenin-1、夏佛塔苷和vicenin-3三种有效成分含量的方法，并分析研究其富集部位，为广金钱草药材的质量控制提供新的理论依据。
　　 本研究首先采用大孔树脂柱层析、反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析、结晶纯化、制备液相等多种分离手段对广金钱草进行分离纯化，从中制备得到三个单体化合物，利用光谱法(1HNMR、13CNMR)和化学方法对其进行了结构鉴定，分别为:vicenin-1(1)、夏佛塔苷(2)、vicenin-3(3)。3个化合物的纯度均达到98％以上，用以作为含量测定的标准品。
　　 通过对广金钱草药材提取方法的筛选和色谱条件的优化，建立了用RP-HPLC同时测定vicenin-1、夏佛塔苷和vicenin-3三种有效成分含量的方法。茎中三个化合物的含量分别为0.37mg/g、1.17mg/g、0.37mg/g，叶中三个化合物的含量分别为2.96mg/g、9.97mg/g、3.74mg/g，地上部分三个化合物的含量分别为1.25mg/g、4.10mg/g、1.47mg/g。通过比较广金钱草茎、叶和地上部分中vicenin-1、夏佛塔苷和vicenin-3的含量，发现广金钱草各部位中三种化合物的含量差异较大，有效成分多富集在叶子中，叶中三种成分的含量均是茎的8.5倍左右。这一结果对广金钱草药材的采摘有一定的指导意义，同时也完善了广金钱草药材的质量控制研究。

目录

声明

摘要

第1章 绪论

1．1 论文的研究背景及意义

1．2 本课题的来源

1．3 论文的研究内容和方法

1．3．1 研究内容

1．3．2 研究方法

第2章 山蚂蝗属植物的研究进展

2．1 背景及种质资源概况

2．2 山蚂蝗属植物化学成分的研究进展

2．2．1 黄酮类化合物

2．2．2 生物碱类

2．2．3 甾体及其苷类

2．2．4 萜类及其苷类

2．2．5 有机酸类

2．2．6 挥发油类

2．2．7 其他成分

2．3 山蚂蝗属植物药理作用的研究进展

2．3．1 利胆作用

2．3．2 利尿作用

2．3．3 抗泌尿系统结石作用

2．3．4 对心血管系统的影响

2．3．5 保肝作用

2．3．6 抗氧化作用

2．3．7 抗炎、镇痛及抗菌作用

2．3．8 益智作用

2．3．9 对血液的影响

2．3．10 急性毒性

2．4 山蚂蝗属植物的应用

2．4．1 药用价值

2．4．2 饲草与饲料

2．4．3 固氮有机绿肥

2．4．4 园林景观与草坪

第3章 广金钱草中三种黄酮碳苷的制备

3．1 引言

3．2 实验部分

3．2．1 仪器、试剂及原料

3．2．2 提取与分离

3．2．3 化合物的结构鉴定

第4章 广金钱草有效成分的含量测定

4．1 实验仪器与试药

4．2 样品提取方法及检测条件的选择

4．2．1 样品提取方法的选择

4．2．2 检测条件的选择

4．3 含量测定方法学考察

4．3．1 色谱条件

4．3．2 对照品溶液的制备

4．3．3 供试品溶液的制备

4．3．4 线性关系考察

4．3．5 精密度试验

4．3．6 稳定性试验

4．3．7 重复性试验

4．3．8 加样回收率试验

4．4 广金钱草药材有效成分的含量测定

4．5 小结

结论

致谢

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的论文