藏药榜那的鉴别及炮制减毒研究

摘要

目的：榜那（????? 藏语音译名）为疗效确切的毒性药材，其名称与基源从古至今均有争议。在近现代随着汉、藏医药学的融合，榜那与中药铁棒锤的名称及其习用品存在十分严重的同物异名与同名异物现象。今以榜那的基源“种”及与习用品的种间距离，榜那及其习用品药材的特征，榜那药材主要毒性成分以及减毒的炮制方法进行研究。拟解决榜那及其习用品的混淆和安全用药问题，为榜那的口服限量标准制定和习用品的进一步开发利用奠定良好的基础。 方法：采用文献考证法、药材名称解读法及植物分类方法进行综合分析，确定榜那（铁棒锤）药材名称和对应的基源植物。通过生药学的性状、显微、粉末鉴别技术对铁棒锤及其习用品多裂乌头进行对比，拟解决榜那（铁棒锤）与多裂乌头（雪上一枝蒿）混淆的问题。采用DNA条码技术确定榜那（铁棒锤）及其习用品和混淆品（乌头属5个种）的的种间距离，分析其毒性大小与种间关系。通过建立稳定的HPLC含量测定方法，对榜那（铁棒锤）及多裂乌头、缩梗乌头进行毒性成分分析，确定其毒性大小。采用煎液加蜜混合解毒法、藏医诃子制法、现代高压制法及真菌制法，比较对榜那（铁棒锤）的解毒作用大小。 结果：榜那（?????藏语音译名）是榜阿那保中最具毒性的一种，现亦名铁棒锤（中药名），为汉、藏、蒙民族均应用较广的抗炎、镇痛、局麻药物，其基源为毛茛科植物铁棒锤Aconitum pendulum Busch、伏毛铁棒锤A. richardsonianum Hand.-Mazz的干燥块根。通过生药性状特征比较，榜那（铁棒锤）与多裂乌头外观相似，但多裂乌头的根更粗（平均直径可达 1.3cm），呈圆柱形或圆锥形，断面中心多为中空小孔，无纺锤形；榜那（铁棒锤）两头微尖特征可予以区别。榜那（铁棒锤）粉末多螺纹、梯纹导管，石细胞明显可见。多裂乌头则多为网纹导管，石细胞明显偶见。DNA条形码表明：榜那（铁棒锤）与多裂乌头、缩梗乌头聚为一大支，在亲缘关系上较近，太白乌头和高乌头聚为另一支与榜那（铁棒锤）亲缘关系较远。榜那（铁棒锤）及习用品多裂乌头A. polyschistum、缩梗乌头A. sessiliflorum均含有苯甲酰乌头原碱、乌头碱、脱氧乌头碱；3-乙酰乌头碱在 3 个批次的多裂乌头与部分批次榜那（铁棒锤）中存在。多裂乌头的乌头碱平均含量为榜那（铁棒锤）的1.4倍，而脱氧乌头碱的平均含量为榜那（铁棒锤）的2.6倍，仅苯甲酰乌头碱的含量低于榜那（铁棒锤）；可见多裂乌头毒性（药 用成分）远高于榜那（铁棒锤）而疗效显著，曾经为87版四川省中药材标准收载（与铁棒锤、伏毛铁棒锤同为雪上一枝蒿的基源）。缩梗乌头的乌头碱平均含量仅为榜那（铁棒锤）0.28 倍，太白乌头和高乌头则不含以上 4 种毒性成分。传统煎液加蜜混合解毒法、藏医诃子制法、现代高压制法及真菌制法均有减毒作用，其中高压减毒制法工艺较易掌握，重现性好。 结论：榜那（铁棒锤）药材应遵照《卫生药品标准﹒藏药》收载的毛茛科植物铁棒锤Aconitum pendulum Busch、伏毛铁棒锤A. richardsonianum Hand.-Mazz的干燥块根为唯一标准，各地方标准或其它相关书籍涉及药名、音译名、基源植物时应避免与之混淆。多裂乌头疗效明显并且在四川阿坝栽培量较大，而雪上一枝蒿药名已被占用，建议另立药物名称收入地方药材标准。缩梗乌头、太白乌头、高乌头不宜与铁棒锤或雪上一枝蒿同用。榜那（铁棒锤）的四种炮制方法均有减毒作用，可根据临床需要加以选择。

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摘 要

Abstract

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第1章 绪论

1.1 榜那研究背景

1.2 研究目的

1.3 研究内容

1.4 研究意义

1.5 榜那考证

1.5.1 榜那藏医典籍考证

1.5.2 本草考证

1.5.3 中（藏）药标准

1.5.4 小结

1.6 榜那化学成分研究

1.7榜那药理作用及临床应用研究

1.7.1 抗炎作用

1.7.2 镇痛作用

1.7.3 抑菌作用

1.8 乌头属类药材炮制研究

1.8.1 炮制机理研究

1.8.2 藏医对榜那的炮制研究

1.8.3 中医对乌头的炮制研究

1.8.4 现代炮制方法研究

1.9 课题来源

第2章 榜那的生药学研究

2.1 药材来源

2.2 藏药榜那的药材性状鉴别

2.2.1 铁棒锤

2.2.2 多裂乌头

2.2.3 小结与讨论

2.3藏药榜那的显微鉴别

2.3.1 实验仪器、试剂及药材

2.3.2 实验方法

2.3.3 实验结果

2.3.4 小结

2.4 藏药榜那的粉末鉴别

2.4.1 实验仪器、试剂及药材

2.4.2 实验方法

2.4.3 实验结果

2.4.4 小结

第3章 基于DNA条形码的乌头属植物鉴别研究

3.1实验仪器、试剂与药材

3.1.1实验仪器

3.1.2实验试剂

3.1.3实验药材

3.2 实验方法

3.2.1 DNA提取

3.2.2 DNA序列数据分析

3.3实验结果分析

3.3.1序列分析

3.3.2二级结构预测

3.4小结与讨论

第4章 藏药榜那的定性鉴别

4.1 实验仪器与材料

4.2 色谱条件

4.2.1 检测波长的选择

4.2.2流动相pH的选择

4.2.3 色谱条件

4.3 对照品溶液的制备

4.4 供试品溶液的制备

4.5 实验结果

4.6小结与讨论

第5章 铁棒锤及其习用品中3种生物碱的含量测定

5.1 实验仪器、药材、对照品

5.2 色谱条件

5.3 对照品溶液的制备

5.4 供试品溶液的制备

5.5 系统适应性考察

5.6 方法学考察

5.6.1 线性关系考察

5.6.2 精密度试验

5.6.3 稳定性试验

5.6.4 重复性试验

5.6.5 加样回收率试验

5.7 样品的含量测定

5.8 讨论

5.8.1 流动相的选择

5.8.2 测定结果分析

5.9 小结

第6章 榜那炮制前后化学成分研究

6.1 榜那不同炮制品的制备

6.1.1 实验仪器、材料、对照品

6.1.2 炮制品的制备

6.2 榜那炮制前后化学成分研究

6.2.1 对照品溶液的制备

6.2.2 供试品溶液的制备

6.2.3 色谱条件

6.2.4 实验结果

6.3 小结与讨论

结 论

致 谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文