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三角帆蚌外套膜碱性磷酸酶的分布及其与钙质代谢的关系

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前言

第一章碱性磷酸酶在三角帆蚌外套膜中的分布

1引言

2.材料与方法

3.结果

4.讨论

第二章三角帆蚌外套膜碱性磷酸酶与钙代谢的关系

1引言

2.材料与方法

3.结果与分析

3.1细胞的培养

3.2 Mg离子和左旋咪唑对钙分泌的影响

3.3放线菌酮对钙分泌的影响

3.4温度对碱性磷酸酶及钙质沉积的影响

4.讨论

结语

参考文献

附录

致谢

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摘要

三角帆蚌是我国淡水珍珠产业的主要经济动物,珍珠不仅具有很高的观赏价值,而且具有独特的应用价值,因此培育高质量的珍珠尤为重要。贝类的矿质硬壳和光泽美丽的珍珠,其主要成分都是碳酸钙,占90%以上。贝壳和珍珠都是贝类进行钙代谢,最终以碳酸钙结晶形式沉积而成的。碱性磷酸酶能促进钙质的沉积,因此利用外界环境改变碱性磷酸酶的活性,增强钙质的分泌,能够有效的提高珍珠的质量。 本实验首先对三角帆蚌外套膜组织进行石蜡切片,经过HE染色染色,显示了三角帆蚌外套膜的组织结构;经过碱性磷酸酶钙-钴法染色,确定了碱性磷酸酶主要分布在三角帆蚌外套膜的粘膜层。然后,利用体外培养三角帆蚌外套膜细胞的方法,在细胞培养液中分别加入碱性磷酸酶激活剂、抑制剂和放线菌酮,并用原子吸收光谱仪检测钙离子的含量和碱性磷酸酶的活力,确定了碱性磷酸酶与钙代谢的关系,结果表明:当加入碱性磷酸酶激活剂时,其活力升高,钙离子浓度升高;而加入抑制剂时,其活力降低,钙离子浓度相应下降;加入放线菌酮时,碱性磷酸酶和钙离子浓度开始升高,后来下降,其结果与蛋白质抑止剂的作用相一致。同时,又进行了温度对三角帆蚌活体内的外套膜碱性磷酸酶的影响,实验表明:当温度升高时(在一定范围内),碱性磷酸酶的活力增强,钙离子的分泌量也增强;当温度下降时,碱性磷酸酶的活力随之下降,钙离子的分泌量随之下降。通过对三角帆蚌活体内培育的有核珍珠的珠核上钙质沉积量的观察,也显示了在24℃时钙质的沉积最好;随着温度的下降,钙质的沉积越来越少。综合上述结果,表明三角帆蚌外套膜的碱性磷酸酶有促进钙代谢的作用。

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