金鱼遗传差异和亲缘关系研究及人工诱导雌核发育金鱼的初步研究

摘要

采用PCR技术扩增了红草金鱼(RC)，红文鱼(RF)，红顶白高头(WR)，白珍珠(WP)，红龙睛蝶尾(MB)，红狮头(RT)，红水泡(RB)，墨龙睛(BM)八个品种金鱼和野生鲫鱼(WC)线粒体DNA的D-Loop区部分序列，PCR产物经纯化、测序、同源序列比对后获得长度为699bp的核苷酸序列。结果显示，在129个样本中共检测到了17个单倍型，9个品种共享1种单倍型，5个品种的金鱼(BM，MB，WR，RE，RC)检测到各自独有的单倍型。遗传距离和聚类分析结果显示6个品种金鱼(WP，BM，MB，RT，WR，RB)首先聚在一起，然后依次与红文鱼(RF)、红草金鱼(RC)、野生鲫鱼(WC)聚在一起。金鱼首先演化为草系金鱼，草系金鱼在演变为文系中较为古老的品种之后，经过进一步的变异，分化出金鱼其他各个品种。 从43对微卫星引物中筛选出8对引物对8个品种的金鱼和鲫鱼225个个体进行了扩增，共产生了28个等位基因，平均每个位点多于3个等位基因，其中MFW7位点的等位基因最多，为5个。遗传杂合度在0至0.4998间，平均遗传杂合度值在0.1419至0.3540之间，从高到低的顺序是鲫鱼、红草金鱼、红龙睛蝶尾、红狮头、墨龙睛、白珍珠、红文鱼、红顶白高头。遗传相似性指数和遗传距离结果表明：品种间遗传相似性指数最小的为红文鱼和红草金鱼，它们的遗传距离最大(0.9435)，而红水泡与红顶白高头的遗传相似性指数最大(0.4642)，它们的遗传距离最小(0.6286)。聚类分析结果表明8个品种金鱼均起源于鲫鱼，8个品种分为2支：红文鱼、白珍珠、红水泡和红草金鱼为一枝，其中红文鱼和白珍珠并在一起，红水泡和红草金鱼并在一起；红龙睛蝶尾、红顶白高头、红狮头和墨龙睛为另一枝。 初探了人工诱导雌核发育金鱼技术，并观察了红龙睛蝶尾金鱼雌核发育早期胚胎的发育过程。诱导采用两支30W的紫外灯管，照距10cm，照射时间15min，冷休克30min效果较好。将金鱼雌核发育早期胚胎发育过程分为7个阶段，21个时期。在22℃±1℃水温条件下，卵子在激活1h后开始第一次卵裂，3h结束卵裂，6小时结束胚胎发育，15小时开始脑分化，26h开始心跳，69～72小时孵化出膜，100小时开始自由游泳。对比前人对金鱼和鲫鱼的胚胎发育观察结果发现，雌核发育金鱼二倍体胚胎与普通鲫鱼和金鱼受精胚胎发育时序基本相同。研究结果为金鱼雌核发育育种提供重要依据和指导。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言：金鱼系统演化遗传育种研究进展

第一部分八个品种金鱼和野生鲫鱼的遗传差异及亲缘关系研究

1材料方法

2结果与讨论

2.1线粒体控制区遗传差异和亲缘关系研究

2.2 8个微卫星位点的遗传差异和亲缘关系研究

3联合线粒体和微卫星结果分析

第二部分人工诱导雌核发育金鱼的初步研究

1实验材料

2方法

3结果

4讨论

小结

参考文献

致谢