樟类植物叶提取液对油樟愈伤组织悬浮培养的影响

摘要

油樟是提炼天然香料的优良树种，油樟榨取的樟油中含有极具经济价值的1，8-桉叶油素，为了提高1,8-桉叶油素的产量，增大油樟资源的利用率，可以尝试用植物组织培养的方法，通过增加1，8-桉叶油素的前体物质(主要是生物碱和鞣质类)在油樟愈伤组织悬浮培养的次生代谢物中的积累量来达到观察效果。以油樟(Cinnamomum longepaniculatum)叶片作为外植体，在B5+6BA(2mg/L)+NAA(0.5mg/L)固体培养基上进行愈伤组织的诱导和继代培养，经继代培养增殖后，分别在培养基中加入浓度分别为5 g(叶)·L-1、8 g(叶)·L-1、10 g(叶)·L-1、12 g(叶)·L-1、15 g(叶)·L-1的油樟叶提取液和大叶樟叶提取液，观察其对油樟愈伤组织生长的影响，筛选出可以促进愈伤组织生长的浓度范围。结果表明，在5 g(叶)·L-1、8 g(叶)·L-1浓度下，油樟叶提取液和大叶樟叶提取液能促进油樟愈伤组织生长，同时，两者促进愈伤组织生长的时间有一定的差异。建立油樟愈伤组织悬浮培养体系，在三组液体悬浮培养基中分别加入0 g(叶)·L-1、5 g(叶)·L-1、8 g(叶)·L-1的油樟叶提取液和大叶樟叶提取液，在摇床内培养40天后鉴定悬浮培养中产生的次生代谢物，结果表明，油樟愈伤组织悬浮培养产生的次生代谢物有生物碱和鞣质类成分，5 g(叶)·L-1、8 g(叶)·L-1的油樟叶提取液和大叶樟叶提取液都能增加生物碱和鞣质类成分在次生代谢物中的积累量。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：图表目录

声明

1引言

2油樟愈伤组织诱导的材料与方法

2.1材料

2.1.1樟类植物叶片来源

2.1.2实验药品

2.1.3实验器材

2.2实验方法

2.2.1培养基的配制及灭菌操作

2.2.2无菌外植体的获得

2.2.3接种操作

2.2.4油樟叶水提液的制备

2.2.5大叶樟叶水提液的制备

2.2.6油樟愈伤组织的建立及初代培养

2.2.7添加不同浓度的油樟叶提取液进行愈伤组织继代培养

2.2.8添加不同浓度的大叶樟叶提取液进行愈伤组织继代培养

2.2.9培养条件

2.2.10建立悬浮培养体系

2.2.11鉴定次生代谢产物

3结果与分析

3.1不同灭菌时间对固体培养基pH值的影响

3.2不同规格的三角瓶对油樟愈伤组织生长的影响

3.3油樟叶提取液对愈伤组织生长的影响

3.3.1油樟叶提取液对油樟愈伤组织生长直径的影响

3.3.2油樟叶提取液对油樟愈伤组织生长重量的影响

3.3.3油樟叶提取液对油樟愈伤组织生长颜色的影响

3.4大叶樟叶提取液对愈伤组织生长的影响

3.4.1大叶樟叶提取液对油樟愈伤组织生长直径影响

3.4.2大叶樟叶提取液对油樟愈伤组织生长重量的影响

3.4.3大叶樟叶提取液对油樟愈伤组织生长颜色的影响

3.5次生代谢产物鉴定结果

3.5.1悬浮培养的结果

3.5.2次生代谢产物中生物碱类的检测

3.5.3检测次生代谢产物中鞣质类

4讨论

4.1不同浓度樟类植物叶提取液促进愈伤组织生长效果的比较

4.2不同浓度樟类植物叶提取液促进次生代谢产物积累的比较

4.3不同樟类植物叶提取液的选择

小结

文献综述

1油樟的历史考证

2樟属植物的品种

3宜宾的油樟资源

4油樟的形态特征与经济价值

5油樟的利用

5.1采叶炼油

5.2油樟树蔸炼油

5.3樟油

5.4樟脑的用途

5.5黄樟油加工

6植物组织培养

6.1理论起源

6.2植物组织培养的概念

6.3植物组织培养步骤

6.4植物组织培养的特点

6.5植物组织培养的意义

6.6植物组织培养的发展

6.7植物组织培养的应用

7油樟组织培养的研究现状

8油樟愈伤组织悬浮培养

8.1愈伤组织培养

8.2植物细胞悬浮培养的研究进展

8.3次生代谢产物(Secondary metabolites)

9本文立题依据

10总结与展望

参考文献

致谢