玉米未成熟胚胚性愈伤组织诱导率与内源激素的关系

摘要

该研究以18-599白、18-599红、R15、R08、R09、S37、A318、综31、C501和先早17共10个玉米自交系为材料,用未成熟胚诱导出愈伤组织,用酶联免疫法(ELISA)测定10个自交系未成熟胚和诱导出的胚性及非胚性愈伤组织脱落酸(ABA)、吲哚乙酸(IAA)、双氢玉米素核苷(DHZR)、玉米素核苷(ZR)、异戊烯基核苷(IPA)、赤霉素(GA<,3>和GA<,4>)七种内源激素的含量,并对未成熟胚和胚性愈伤组织中内源激素含量与胚性愈伤组织诱导率的关系,以及愈伤组织培养过程中内源激素含量的变化进行了分析.在胚性愈伤组织诱导率不同的玉米自交系间,未成熟胚和胚性愈伤组织的内源激素含量,是决定未成熟胚胚性愈伤组织诱导率的关键因素之一.未成熟胚内源ABA和IAA的含量及ABA/GA<,3>的比值,与胚性愈伤组织诱导率呈显著的正相关关系.然而,在胚性愈伤组织中,内源ABA、含量与胚性愈伤组织诱导率显著正相关,内源IAA和GA<,3>含量与胚性愈伤组织诱导率负相关.对比胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织中的内源激素的含量时发现,胚性愈伤组织的内源IAA、DHZR、ZR、IPA和GA<,4>含量,均高于非胚性愈伤组织,但内源ABA和GA<,3>含量却低于非胚性愈伤组织.对愈伤组织发生前后内源激素含量变化的分析表明,内源ABA和IAA含量是胚性愈伤组织发生的关键诱导因子.在胚性愈伤组织发生前,内源ABA和LAA含量,以及ABA/IAA和ABA/GA<,3>两个比值,均呈上升趋势.伴随着胚性愈伤组织的发生,内源ABA和IAA含量,以及ABA/IAA和ABA/GA<,3>均出现峰值,随后则呈大幅下降趋势.与之相反,内源GA<,3>含量在胚性愈伤组织发生时达到最低点,随后呈上升趋势.综上所述,各种不同内源激素的含量及其相互之间的比值,是决定玉米自交系愈伤组织诱导率高低的重要因素之一.若适当改变培养成分,诱导未成熟胚内源激素水平发生变化,就有可能向有利于提高胚性愈伤组织诱导率的方向发展.

目录

摘要

ABSTRACT

第一部分文献综述

1.玉米组织培养的发展概况

1.1玉米组织培养的研究进展

1.2玉米未成熟胚胚性愈伤组织培养的意义

1.3玉米愈伤组织诱导的影响因素

2.提高玉米愈伤组织培养效率的研究

2.1选育具有优良培养特性的自交系

2.2选用合适的外植体

2.3选择最适的植物激素量

3.本研究的目的和意义

第二部分实验材料与方法

1.材料的准备

1.1玉米未成熟胚的接种及愈伤组织的诱导

1.2选取材料

1.3培养基的配制

2.内源激素的检测——酶联免疫法(ELLISA)

2.1试剂配制

2.2样品内源激素测定

3.统计分析方法

第三部分结果与分析

1.不同基因型玉米的胚性愈伤组织诱导率

2.内源激素对胚性愈伤组织诱导率的影响

2.1不同自交系未成熟胚中内源激素的含量对胚性愈伤组织诱导率的影响

2.2愈伤组织中内源激素含量与胚性愈伤组织诱导率的关系

2.3同一基因型培养过程中愈伤组织的内源激素的变化

第四部分讨论

1内源ABA和IAA对胚性愈伤组织诱导和细胞胚性保持的影响

2内源激素间的平衡与体细胞胚胎发生和发育的关系

3通过调整外源激素水平提高玉米未成熟胚的胚性愈伤组织诱导率的探讨

参考文献

致谢