免疫组化检测PRRSV方法的建立及其应用于PRRSV感染仔猪后病毒在各器官分布定植规律的研究

摘要

本研究以蔗糖密度梯度离心法提纯的PRRSV-SC1株作为抗原，免疫家兔制备兔抗PRRSV的IgG，成功建立了检测猪繁殖与呼吸道综合症病毒抗原的间接免疫酶组织化学法。经交叉试验、吸收试验、替代试验和阳性、阴性对照试验表明该法具有敏感性高，特异性好的优点。　　该方法只与PRRSV感染猪组织呈现阳性反应，与猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪乙脑病毒人工感染并致死仔猪的肝脏组织呈现阴性反应。PRRSVSC-1株人工感染28日龄仔猪后第5天起有个别猪开始出现打喷嚏，眼睑水肿以及腹泻，被感染猪群的体温变化并不明显。剖检病变从14天起以淋巴结出血为主，特别是颌下淋巴结、肩前淋巴结、肺门淋巴结、髂下淋巴结、腹股沟淋巴结等出血较严重。初期可见感染的肺组织肺泡壁毛细血管充血，血管内皮肿胀，肺泡腔细胞成分增多，随后可见感染后肺组织发生弥浸性间质性肺炎。用该方法检测人工感染仔猪，在增宽的肺泡隔中散在的数量不等的巨噬细胞胞浆检测到阳性，其中的毛细血管以及与支气管和细支气管并行的小脉管内皮细胞胞浆也检测到少量的抗原，在支气管粘膜下以及细支气管周围浸润的细胞中散在的巨噬细胞胞浆也检测到了抗原；脾脏的阳性主要分布于滤泡的生发中心以及其周围的边缘区和脾窦周围；扁桃体的隐窝及其周边检测到阳性；在胸腺小体，胸腺的皮质和髓质都散在阳性信号；淋巴结的阳性主要分布在髓索内、皮髓质窦周围，有时也出现在窦内、淋巴小结周围的疏松结缔组织内；肠绒毛粘膜上皮细胞，淋巴集结的淋巴小结生发中心也检测到了阳性。肝脏肿大的库氏细胞和汇管区浸润的少量巨噬细胞中检测到了阳性。

目录

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前言

1材料与方法

1.1试验材料

1.2方法

2试验结果

2.1免疫组化方法检测PRRSV的建立和优化

2.2人工感染仔猪后的临床症状及病变

2.3免疫组化方法检测PRRSV的抗原分布规律

3讨论

3.1免疫组化方法的建立和优化

3.2免疫组化方法检测PRRSV的抗原分布规律

3.3与其他用于诊断和检测PRRSV感染方法的比较分析

4结论

5参考文献

致谢

附录二