填饲诱导鹅肥肝形成差异及调控肝极低密度脂蛋白—甘油三酯组装与分泌相关基因的表达研究

摘要

在动物肝细胞内，甘油三酯(TAG)的异常沉积导致肝脂肪变性。在实验模式动物中，肝脂肪变性的一个重要因素是VLDL-TAG的形成与分泌受到了抑制。对鹅和鸭填饲高能碳水化合物诱发肝脂肪变性，而获得经济价值极高的肥肝。但是，对填饲所诱发的肥肝及肝外脂肪沉积差异的具体机制目前仍不清楚。本研究以产肝性能较好的朗德鹅和产肝性能中等的四川白鹅为实验材料，对填饲诱导鹅肥肝形成差异及调控VLDL-TAG组装与分泌的相关基因表达进行研究，取得了如下结果： 1.在单位体重填饲等量高能碳水化合物的情况下，填饲两周后，朗德鹅与四川白鹅的肝脂质中TAG含量已超过90％；朗德鹅的肝重率和肝脂质含量极显著地高于四川白鹅(肝重率：8.55％VS6.07％；肝脂质含量：46.87％VS38.47％)；但是与对照组相比，朗德鹅皮脂率及腹脂率的增加均显著低于四川白鹅。结果表明，朗德鹅肝脏利用食物中的碳水化合物合成的脂类优先贮存在肝脏；而四川白鹅肝脏合成的脂类却能更好地在肝脏和脂肪组织之间进行分配，脂类贮存在脂肪组织的效率更高。 2.填饲后，朗德鹅与四川白鹅的血浆VLDL和TAG浓度是对照组的2倍；四川白鹅的血浆VLDL水平显著高于朗德鹅，且与肝重显著正相关，这表明四川白鹅血浆中VLDL水平是肝中脂质合成与外周组织脂质的吸收利用之间一个较好的平衡因素。 3.在朗德鹅与四川白鹅肝脏、小肠、脂肪组织、肌肉组织、睾丸中检测到DGAT2的表达；LPL基因在脂肪组织、骨骼肌、心肌、脑和睾丸中表达，但在肝与小肠中不表达；MTP不仅在肝脏与小肠中表达，而且在脑中也有表达。填饲结束时，在朗德鹅与四川白鹅肝脏中有DGAT2与MTP基因的表达，在胸肌、腿肌、皮脂和腹脂中有LPL基因的表达。 4.填饲下调四川白鹅与朗德鹅肝组织中TGH、DGAT2酶活性及DGAT2、MTPmRNA表达，上调脂肪组织与肌肉组织中LPL的表达。填饲后，朗德鹅与四川白鹅肝组织中DGAT2酶比活性及朗德鹅的DGAT2mRNA表达丰度显著低于对照组；朗德鹅与四川白鹅肝素后血浆中的LPL活性极显著地高于对照组。 5.填饲组中，朗德鹅血浆胰岛素浓度、肝组织DGAT2mRNA表达水平及其酶比活性显著低于四川白鹅(P＜0.05)，其值分别为：10.28与11.53(mmol/1)、1.23与1.41及2.24与2.95(10-1nmolTripalmitoylglycerol/min/mgmicrosomalprotein)。并且在朗德鹅中，血浆胰岛素浓度和肝中DGAT2mRNA表达水平及酶比活性呈显著负相关。表明填饲组中，朗德鹅和四川白鹅肝组织中DGAT2基因的表达差异与血浆胰岛素水平的差异紧密相关；朗德鹅中血浆胰岛素水平显著抑制DGAT2的mRNA表达及酶活性。 6.填饲组中，四川白鹅血浆葡萄糖浓度显著低于朗德鹅，肝TGH酶活性高于朗德鹅，并且朗德鹅中血浆葡萄糖浓度与肝TGH酶活性呈显著负相关。四川白鹅血浆胆固醇浓度与LPL总的活性显著相关：r=0.53，P＜0.05。 7.经填饲，在朗德鹅中肝DGAT2的mRNA表达丰度及酶比活性与肝脂质中TAG含量显著负相关，而在四川白鹅中它们与血浆TAG浓度呈显著的正相关；四川白鹅中LPL总的酶活性与血浆VLDL浓度呈显著的负相关。朗德鹅肝组织DGAT2酶比活性、肝外LPL总活性与肝重显著负相关；肝外LPL总活性与皮脂率显著正相关。四川白鹅中肝外总LPL活性与腹脂率、皮脂率显著正相关；且LPL活性极显著地高于朗德鹅，分别为：11.40与7.61微摩尔棕榈酸/毫升小时。表明填饲可通过诱导与鹅肝VLDL-TAG组装、分泌的相关蛋白质的差异表达而调节肝脂质中TAG含量及血浆TAG浓度，从而调节肝及肝外组织的脂肪沉积。朗德鹅较低的肝DGAT2酶比活性和较低的肝外LPL活性，可能使得肝VLDL-TAG分泌部分受阻与血浆中VLDL-TAG利用减少，导致形成极度脂肪变性的“肥肝”；四川白鹅较高的LPL活性可能使得TAG较好地在肝与肝外分配，而形成中等强度的肝脂肪变性和较大程度的肝外脂肪沉积。

目录

论文独创性声明及关于论文使用授权的声明

前言

第一章文献综述

第二章填饲诱导鹅脂肪沉积及血浆参数的差异研究

第三章与VLDL-TAG生成、分泌相关基因的表达特性

第四章参与VLDL-TAG组装、分泌的蛋白质在鹅填饲诱导脂肪沉积中的表达与调控

第五章结论

主要创新之处：

参考文献

附录

致谢