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声明
1文献综述
1.1苏云金芽胞杆菌概述
1.2苏云金芽胞杆菌的血清型分类
1.3杀虫晶体蛋白(ICPS)
1.4苏云金芽胞杆菌VIPs
1.5农业害虫甜菜夜蛾和棉铃虫
1.6立题设想
2材料与方法
2.1材料及培养基
2.1.1供试菌株
2.1.2PCR扩增用引物
2.1.3供试害虫
2.1.4培养基
2.1.5限制性内切酶和其它酶类
2.1.6缓冲液
2.2实验方法
2.2.1菌株分离
2.2.2PCR扩增反应体系
2.2.3热循环反应
2.2.4杀虫晶体蛋白SDS-PAGE
2.2.5SDS聚丙烯酰胺凝胶的灌制
2.2.6cry9Ea4全基因和Vip3A部分基因的克隆
2.3活性测定
2.4菌种鉴定
2.4.1菌体形态特征
2.4.2培养特征
2.4.3生理生化特征
2.4.4细胞壁化学组分分析
2.5仪器设备
3结果与分析
3.1菌株分离
3.2菌株的伴孢晶体形态的多样性
3.3 Bt分离株SDS-PAGE
3.4苏云金芽胞杆菌cry基因的鉴定
3.5 Bt菌株Vip3A基因的鉴定
3.6菌株ZG5-4 cry9Ea4基因的克隆分析
3.6.1菌株ZG5-4中cry9Ea4全长基因的克隆
3.6.2crygEa4基因的核苷酸序列测定与分析
3.6.3cry9Ea4氨基酸序列及蛋白质特性分析
3.7菌株HY3-2 Vip3A基因的克隆分析
3.8生测结果
3.9 ZG5-4、HY3-2苏云金芽胞杆菌的鉴定
3.9.1形态特征、培养特征、生理生化特征
3.9.2菌株鉴定结果
4讨论
后续研究的设想
5结论
致谢
参考文献