不同时期猪源大肠杆菌对抗生素耐药表型、耐药基因比较研究

摘要

本研究对我国西南地区1999、2003年的猪源致病性大肠杆菌(由四川大学动物疾病防控生物工程研究中心保存)和2006年自主分离鉴定的猪源致病性大肠杆菌各30株，采用中国兽医监查所提供的方法进行血清型鉴定。用K-B(Kirby-Bauer)法进行细菌耐药表型的检测，同时采用多重PCR进行耐药基因检测，对以上3个年份的猪源致病性大肠杆菌的耐药表型和耐药基因型的流行情况进行了比较研究。 血清型鉴定结果显示：1999年流行的主要血清型为09(14.3％)、089(14.3％)、0119(14.3％)、060(9.5％)、0101(9.5％)、0141(9.5％)；2003年流行的主要血清型为0138(13.0％)、0157(13.0％)、09(8.7％)、08(8.7％)、038(8.9％)、0139(8.9％)、0141(8.9％)；2006年流行的主要血清型为020(17.6％)、0101(17.6％)、08(11.8％)、045(11.8％)、060(11.8％)、0141(11.8％)。结果说明3个年份的猪源致病性大肠杆菌血清型变化较大，其中仅有0141血清型在不同年份的均相对稳定。 耐药表型检测结果显示：1999、2003、2006年耐药率分别为，四环素93.3％、100％、100％：强力霉素53.3％、83.3％、96.7％；氟苯尼考33.3％、56.7％、50.0％；庆大霉素26.7％、33.3％、40.0％；卡那霉素26.7％、80.0％、70.0‰磺胺甲基异恶唑23.5％、53.3％、76.7％：链霉素20.0％、50.0％、90.0％；复方新诺明19.5％、50.0％、80.0％；大观霉素20.0％、20.0％、20.0％；新霉素10.0％、16.7％、46.7％；妥布霉素6.7％、3.3％、26.7％；结果可以看出3个年份的猪源致病性大肠杆菌耐药性发生了较大的变化，耐药率成逐年增加的趋势。 耐药基因检测结果显示：1999、2003、2006年耐药基因的检出率分别为：sull23.3％、46.7％、73.3％；sul26.7％、16.7％、30.0％；sul33.3％、3.3％、6.7％：aadAl6.7％、36.7％、76.7％；aaC23.3％、23.3％、53.3％；aaC46.7％、16.7％、20.0％：aph33.3％、6.7％、6.7％；Catl13.3％、26.7％、30.0％；CmlA3.3％、13.3％、16.7％；floR3.3％、13.3％、20.0％；tetA16.7％、23.3％、40.0％；tetC16.7％、23.3％、40.0％；tetM13.3％、23.3％、23.3％；结果可以看出3个年份的猪源致病性大肠杆菌耐药基因检出率成逐年增加的趋势，该结果与耐药性检测结果相似，说明基因型与耐药表型成正相关。 耐药基因和耐药性比较结果显示，大肠杆菌药物耐药表型与耐药基因符合率较高。 本研究首次对我国西南地区不同年份猪源致病性大肠杆菌耐药表型和耐药基因型进行比较研究。研究大肠杆菌耐药性的流行情况，可以为选择有效药物提供指导，控制耐药致病菌的感染提供科学依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

1前言

1.1猪源大肠杆菌概述

1.2抗生素在防治猪大场杆菌病中的应用情况

1.3猪源大肠杆菌耐药性的研究进展

1.4细菌耐药机理和耐药基因研究进展

1.5耐药表型检测方法研究进展

1.6耐药基因检测方法研究进展

1.7本研究的前期工作基础

1.8本研究的目的意义及创新点

2.试验材料及仪器

2.1 1999年菌株，2003年菌株，标准菌株

2.2样品采集

2.3主要仪器

2.4主要药品

3试验方法

3.1 2006年我国西南地区猪源大肠杆菌的分离鉴定

3.2 1999年、2003年和2006年西南地区猪源致病性大肠杆菌血清型检测方法

3.3 1999年、2003年和2006年西南地区猪源致病性大肠杆菌耐药表型检测方法

3.4 1999年、2003年和2006年西南地区猪源致病性大肠杆菌耐药基因检测方法

4.试验结果

4.1 2006年我国西南地区猪源大肠杆菌的分离鉴定结果

4.2 1999年、2003年和2006年西南地区猪源致病性大肠杆菌血清型检测结果

4.3 1999年、2003年和2006年西南地区猪源致病性大肠杆菌耐药表型检测结果

4.4 1999年、2003年和2006年西南地区猪源致病性大肠杆菌耐药基因检测结果

4.5 1999年、2003年和2006西南地区猪源致病性大肠杆菌耐药表型和耐药基因型比较结果

5.讨论

5.1三个时期猪源大肠杆菌血清型变化

5.2三个时期猪源大肠杆菌耐药表型变化与用药的关系

5.3三个时期猪源大肠杆菌耐药基因型变化

5.4耐药表型和耐药基因的关系

5.5关于耐药基因型检测方法

6.结论

参考文献

致 谢