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四川几种重要药用植物病害调查与川芎根腐病(Fusarium solani)防治初探

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1.前言

1.1研究目的意义

1.2研究现状综述

1.2.1药用植物病害调查研究

1.2.2川芎根腐病的防治现状

1.2.3木霉在生物防治中的应用

1.3研究的主要内容和目标

1.3.1研究目标

1.3.2主要研究内容

2.研究方案

2.1主要药用植物病害的调查与病原鉴定

2.1.1调查地点与对象

2.1.2田间调查及采样

2.1.3病害诊断与病原鉴定

2.2川芎、川牛膝根部内生、附生真菌的分离与鉴定

2.2.1采样

2.2.2分离与鉴定

2.3川芎根腐病、川牛膝黑根病的病原分离与鉴定

2.3.1采样

2.3.2分离与鉴定

2.4川芎根腐病的生防研究

2.4.1生防材料的甑选原则

2.4.2生防菌株的筛选

2.4.3木霉非挥发性产物的拮抗作用

2.4.4木霉重寄生现象的观察

2.4.5拮抗菌生长速度的测定

2.4.6生防盆栽试验

2.5川芎根腐病药剂防治

2.5.1室内药剂筛选

2.5.2盆栽试验

2.6技术路线

3结果与分析

3.1四川几种重要道地中药材的主要病害种类

3.1.1川芎病害

3.1.2川牛膝病害

3.1.3丹参病害

3.1.4芍药病害

3.2川芎、川牛膝根部内生、附生真菌种类

3.2.1川芎内生、附生真菌

3.2.2川牛膝根部内生、附生真菌

3.3川芎根腐病与川牛膝黑根病的初步诊断

3.3.1川芎根腐病

3.3.2川牛膝黑根病

3.4川芎根腐病的生物防治

3.4.1生防菌株的筛选

3.4.2重寄生观察

3.4.3.生防盆栽试验

3.5川芎根腐病的药剂防治

3.5.1 6种杀菌剂对茄腐皮镰刀菌的毒力测定

3.5.2.盆栽药剂试验

4结论与讨论

4.1四川几种重要道地中药材的主要病害调查

4.2川芎、川牛膝根部内生、附生真菌

4.3川芎根腐病与原物的分离、鉴定

4.4川牛膝黑根病的初步诊断

4.5川芎根腐病的生物防治

4.6川芎根腐病室内药剂筛选

4.7盆栽试验

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

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摘要

本研究于2005~一2007年间,对四川都江堰的川芎,雅安天全二郎山的川牛膝,德阳中江的丹参、芍药等重要药材的病害进行了调查,并对川牛膝黑根病进行了初步诊断,分离鉴定了川芎、川牛膝的内生、附生真菌。针对危害严重的川芎根腐病进行了病原鉴定、生物防治和化学防治等研究。 经调查川芎病害主要有根腐病、炭疽病、灰霉病、叶枯病、白粉病、病毒病和菌核病等7种,其中根腐病危害最大,发生最严重;川牛膝有5种病害,即白锈病、褐斑病、炭疽病、根结线虫病和黑根病:丹参有6种病害,即丹参根腐病、白绢病、叶枯病、根结线虫病、病毒病和丹参菟丝子等。还有3种芍药病害,芍药轮纹病、灰霉病和白粉病。 从30个川芎样品中共分离鉴定出4种内生真菌,9种附生真菌,内生真菌以镰孢属和木霉属为主,附生真菌中木霉、镰刀菌和毛霉为主,内生、附生真菌以木霉和镰刀菌为主要种群。 川牛膝根部内生真菌,1年生病根种类少,只有镰刀菌和黑孢霉,1年生健根分离到5种真菌,分别是木霉属、腐霉属、丝核菌、曲霉和黑孢霉,共有的真菌是黑孢霉;2年生病根和健根都分离得到了4个属的真菌,病根内生真菌中,镰刀菌和黑孢霉出现的频率比较高,镰刀菌为44.4%,黑孢霉为38.7%,还分离得到了少量的木霉、链格孢;健根中分离频率最高的是曲霉属,达到了83.4%;另外,枝孢霉属、黑孢霉和茎点霉真菌也偶见。在病根和健根中都出现的真菌种类是黑孢霉;3年生病根中分离得到12个属,而健根中仅分离到5个属,共同出现的真菌种类是镰刀菌、曲霉、青霉、枝孢霉和黑孢霉属真菌。 川牛膝根部附生真菌分离结果表明,1年生病根附生真菌分离得到10个类群,其中以镰刀菌和木霉为主,镰刀菌的分离频度最大为51.9%,1年生健根分离得到的真菌只有3个属,分别是曲霉、柱孢属和丝核菌。1年生病健根中都出现的真菌是柱孢属和丝核菌两类;2年生病根分离得到7种真菌,分别是镰刀菌、柱孢属、毛霉属、丝核菌、黑孢霉、茎点霉和链格孢,以镰刀菌最多。2年生健根共得到5种附生真菌,镰刀菌的分离频度最大为33.3%;3年生病根附生真菌的种类丰富,共有14种,镰刀菌最多,3年生健根分离得到5中附生真菌。病健根共有的真菌是镰刀菌、青霉和黑孢霉。 经分离鉴定,川芎根腐病的病原菌是茄腐皮镰刀菌[Fusariumsolani(Mart)Sacc]。从川牛膝黑根病1、2、3年生病根中分离得到了3种共有的真菌种类,分别是黑孢霉、镰刀菌和柱孢属真菌,回接健康植株,无发病症状,通过综合分析,初步诊断黑根病不属于侵染性病害。 对峙培养结果表明,所试40个木霉菌株对茄腐皮镰刀菌都有不同程度的抑制作用,只有1株没有抑制作用,其中T131-21的抑制效果最好。供试的细菌对病原菌的抑制效果不明显,生防意义不大。木霉生长速度测定结果表明,多数菌株生长迅速,为空间和营养资源的强竞争者。非挥发性代谢产物的拮抗试验中,菌株T131-2,T150-17的抑制率(63.82%)极显著高于其他菌株。生防盆栽试验结果表明,每种预定处理方案对川芎根腐病都有一定的防治效果,处理E(先接生防菌后接病原菌与生防菌)的防治效果最好。 选择了6种杀菌剂进行药剂试验,采用含药平板法测定它们对茄腐皮镰刀菌菌丝生长的抑制作用,并测定了抑菌中量(EC50)。结果表明,6种杀菌剂对川芎根腐病的菌丝生长均有抑制作用,一品甲托最好,其次是百菌清、根腐灵、代森锰锌和多菌灵,治根神医最弱。盆栽试验结果也表明-品甲托的防治效果较好,与室内药剂筛选结果一致。

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