绿萝组织培养及离体再生体系研究

摘要

为建立高效稳定的绿萝离体再生体系，本试验以绿萝幼嫩叶片为外植体材料，采用间接器官发生途径（愈伤组织途径），较系统地研究了绿萝离体再生的技术体系，初步探讨了植物生长调节剂、基本培养基、C源、外植体、AgNO3以及GA3浓度等对绿萝离体再生的影响。结果表明： （1）在绿萝组织培养中，外植体最佳消毒处理为0．1％HgCl2溶液中处理6min； （2）TDZ浓度和生长素浓度对外植体愈伤组织的诱导具有显著影响，生长素种类对外植体愈伤组织的诱导具有极显著影响，TDZ浓度以0．1-0．5mg·L-1为佳，生长素浓度以0．1 mg·L-1和0．5 mg·L-1为佳，在生长素种类中，NAA对愈伤组织的诱导效果最好，2，4-D次之，再其次为IAA和IBA，外植体愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0．2 mg·L-1TDZ+0．5mg·L-1NAA，愈伤组织诱导率可达97．62％； （3）基本培养基对外植体愈伤组织的诱导具有显著影响，在1/4MS、1/2MS和MS中，MS为绿萝愈伤组织诱导最佳基本培养基； （4）C源对外植体愈伤组织的诱导具有显著影响，在蔗糖、麦芽糖和葡萄糖三种糖类中，以蔗糖作为C源外植体愈伤组织诱导效果最好； （5）暗培养时间对外植体愈伤组织的诱导无显著影响； （6）外植体类型对愈伤组织的诱导有显著影响，在叶片（带中脉）、叶柄（叶柄基部）和茎段（不带节）中，以叶片（带中脉）和叶柄（叶柄基部）作为外植体愈伤组织诱导效果较佳； （7）生长素浓度对不定芽的诱导无显著影响，细胞分裂素种类和浓度对不定芽的诱导具有显著影响，在TDZ、KT、6-BA中，以1．0-2．0 mg·L-16-BA不定芽诱导效果最好，不定芽最佳诱导培养基为：MS+0．1mg·L-1NAA+1．0mg·L-16-BA和MS+0．5mg·L-1NAA+2．0mg·L-16-BA； （8）细胞分裂素种类对不定芽增殖具有极显著影响，细胞分裂素浓度对不定芽增殖具有显著影响，而生长素浓度对不定芽增殖无显著影响，2．0 mg·L-16-BA最有利于不定芽增殖，不定芽增殖最适培养基为：MS+2．0 mg·L-16-BA+0．1 mg·L-1NAA； （9）AgNO3对绿萝不定芽增殖具有明显的促进作用，当浓度为3．0 mg·L-1时效果最好，平均增殖倍数为2．05，且无畸形芽的产生； （10）GA3对不定芽增殖具有明显的促进作用，随着GA3浓度的提高，不定芽增殖倍数呈现先升高后降低的趋势，当浓度为3．0 mg·L-1时增殖效果最好，平均增殖倍数为1．71； （11）6-BA浓度对无菌苗壮苗无显著影响，生长素种类及其浓度对无菌小苗壮苗具有显著影响，以MS+1．0 mg·L-16-BA+0．5 mg·L-1IBA最有利于无菌苗的伸长生长，MS+3．0 mg·L-16-BA+0．2 mg·L-1 IAA最有利于无菌苗新叶的发生； （12）绿萝无菌小苗较容易生根，但在不同的生根培养基中，根的数量和质量有明显差异，综合考虑生根率和根生长情况，以1/2MS+0．1mg·L-1NAA+0．2mg·L-1IBA为宜，平均生根率为100％，平均生根条数为5．74条；

目录

文摘

英文文摘

声明

1 文献综述

1.1 绿萝组织培养研究进展

1.2 天南星科观赏植物组织培养研究进展

1.2.1 基因型

1.2.2 外植体类型

1.2.3 植物生长调节剂

1.2.4 基本培养基和C源

1.2.5 其它添加物

1.2.6 培养条件

2 本研究的目的与意义

3 试验材料与方法

3.1 试验材料

3.2 技术路线

3.3 试验方案与方法

3.3.1 培养基的制备及培养条件

3.3.2 外植体的准备

3.3.3 初代培养

3.3.4 分化与增殖培养

3.3.5 壮苗与生根培养

3.3.6 炼苗与移栽

3.3.7 试验结果观测与数据统计分析方法

4 结果与分析

4.1 初代培养

4.1.1 灭菌时间对外植体污染率和褐变率的影响

4.1.2 植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响

4.1.3 基本培养基对愈伤组织诱导的影响

4.1.4 C源对愈伤组织诱导的影响

4.1.5 暗培养时间对绿萝叶片愈伤组织诱导的影响

4.1.6 外植体对愈伤组织诱导的影响

4.2 分化与增殖培养

4.2.1 植物生长调节剂对不定芽分化的影响

4.2.2 植物生长调节剂对不定芽增殖的影响

4.2.3 附加物对不定芽增殖的影响

4.3 壮苗与生根培养

4.3.1 植物生长调节剂对无菌小苗壮苗的影响

4.3.2 植物生长调节剂对无菌小苗生根的影响

4.4 炼苗与移栽

5 讨论

5.1 植物生长调节剂的影响

5.2 基本培养基的影响

5.3 C 源的影响

5.4 外植体的影响

5.5 附加物的影响

5.6 AC的影响

6 问题和下一步工作的建议

参考文献

致谢

附图(Plate):