玉米青枯病菌的鉴定、生物学特性及生物防治研究

摘要

从玉米青枯病发病植株茎秆经组织分离法分离鉴定到3种腐霉菌和4种镰刀菌。其中分离频率较高的有禾生腐霉(Pythium graminicola)、串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)、禾谷镰刀菌(F. graminearum)和肿囊腐霉(P.inflatum)，占所有分离物的比重依次为37.45％、20.08％、18.53％和13.13％。
　　 对上述7种腐霉和镰刀菌菌株进行苗期致病性研究并进行Koch法则验证。结果表明这些病菌对玉米植株均具有致病力，但存在致病力强弱差异。禾生腐霉、肿囊腐霉、禾谷镰刀菌及瓜果腐霉(P. aphanidermatum)的菌株致病力较强，接种试验表明玉米幼苗的病情指数都达到60％以上。而接种镰状镰刀菌(F.fusarioidis)后玉米幼苗的病情指数为8.32％。对发病的玉米幼苗植株根系进行病菌的再分离，均能分离到原病菌，符合Koch法则。
　　 实验选取对玉米青枯病病原分离频率较高、致病力较强的2种病菌(禾谷镰刀菌菌株F82和禾生腐霉菌株P16)进行生物学特性的研究。结果表明禾谷镰刀菌的最适培养基为PDA培养基；菌丝生长温度范围为10℃～35℃，最适温度为25℃；生长最适pH值为7；病菌菌丝生长以葡萄糖为最佳碳源；以蛋白胨为最佳氮源；该菌菌丝在全黑暗条件下生长最好；在最佳固体培养条件实验中该菌在5号实验组(25℃、pH值为6、黑暗)状态下生长最快，显著高于其它实验组。禾生腐霉菌的最适培养基为查彼培养基；菌丝生长温度范围为10℃～40℃，最适温度28℃；生长最适pH值为8；病菌菌丝生长以葡萄糖为最佳碳源；以蛋白胨为最佳氮源；该菌菌丝在半光照条件下生长最好；在最佳固体培养条件实验中该菌在9号实验组(30℃、pH值为8、光暗交替)状态下生长最快，显著高于其它实验组。
　　 从大田作物根际土壤中分离到木霉菌株29株，通过对这些木霉菌株的生长速度、与病原菌的对峙培养、挥发性代谢产物抑菌作用的测定及重寄生现象的观察，筛选出4株具有较高生防潜能的木霉菌株，经鉴定分别为T12(长枝木霉Trichoderma longibrachiatum)、T26(黄绿木霉T.aureovirid)、T19和T20(绿色木霉T viride)。
　　 用筛选出的4株木霉菌株的麦麸砂土培养物对2个玉米品种进行室内盆栽防病试验和大田防病试验。室内盆栽防病试验结果表明，4种木霉菌株培养物对病害具有较好的防效。其中绿色木霉T20和长枝木霉T12培养物对禾谷镰刀菌性玉米青枯病的病指防效较为突出，显著高于其它2个木霉培养物和药剂粉锈宁的防效，T20对玉米品种正红311的防效达到了68.06％。长枝木霉T12培养物对禾生腐霉性玉米青枯病的病指防效最为突出，对正红311的防效达到了70.30％，对玉米品种川单418的防效也达到了65.69％。
　　 田间自然条件下试验结果表明，绿色木霉T20菌株培养物对正红311的青枯病防效最高，达到79.14％，对川单418的防效也较高，达到了60％以上，且显著高于药剂粉锈宁的防效。接种病菌条件下试验结果表明，长枝木霉T12培养物对正红311的青枯病防效为70.22％，绿色木霉T20培养物对川单418的防效为69.29％，二者的防效均高于其它处理，具有潜在的市场应用价值。

目录

文摘

英文文摘

1 前言

1.1 玉米青枯病病原研究现状

1.1.1 病原菌种类研究

1.1.2 病原菌之间相互作用研究

1.1.3 病原菌的致病性及生物学特性研究

1.2 玉米青枯病发病规律及防治现状

1.2.1 玉米青枯病发病规律

1.2.2 玉米青枯病防治现状

1.3 木霉在植物病害生物防治中的应用

1.3.1 木霉概述

1.3.2 木霉菌生防机制

1.3.3 木霉在植物病害生物防治中的应用

1.4 本实验研究的目的和意义

2 材料与方法

2.1 病原菌的分离和鉴定

2.1.1 病株的采集与病原菌分离

2.1.2 病原菌鉴定

2.2 病原菌致病性研究

2.2.1 供试材料

2.2.2 接种材料

2.2.3 实验处理

2.2.4 接种方法

2.2.5 致病性调查

2.3 病原菌的生物学特性研究

2.3.1 影响病原菌菌丝生长的因素

2.3.2 病原菌最佳固体培养条件筛选

2.4 木霉菌株的分离鉴定

2.5 玉米青枯病拮抗木霉菌株的筛选

2.5.1 筛选材料

2.5.2 筛选方法

2.6 拮抗木霉的防效实验

2.6.1 室内盆栽防效实验

2.6.2 田间防效试验

3 结果与分析

3.1 病原菌的分离与鉴定结果

3.2 病原菌致病性研究结果

3.3 病原菌的生物学特性研究

3.3.1 影响病原菌菌丝生长的因素

3.3.2 病原菌最佳固体培养条件筛选结果

3.4 木霉菌株的分离、鉴定结果

3.5 玉米青枯病拮抗木霉菌株的筛选

3.5.1 木霉生长速度的测定结果

3.5.2 对峙培养结果

3.5.3 挥发性代谢产物抑制作用的测定结果

3.5.4 重寄生现象

3.6 拮抗木霉的防效实验

3.6.1 室内盆栽防效实验

3.6.2 田间防效试验

4 结论与讨论

4.1 玉米青枯病病原菌的种类研究

4.2 玉米青枯病病原菌的致病性研究

4.3 玉米青枯病病原菌的生物学特性研究

4.4 对玉米青枯病拮抗木霉的筛选研究

4.5 拮抗木霉的防效实验

4.6 存在的问题和展望

参考文献

致谢