日粮中添加亚硒酸钠对黄曲霉素B1中毒雏鸡肾脏影响的病理学研究

摘要

本研究选用240只1日龄艾维茵肉鸡健雏，随机分为4组，分别饲喂对照组日粮(经检测硒含量为0.332mg/kg)、AFB1组日粮（0.3mg/kg AFB1）、+Se组日粮（在对照组日粮中以亚硒酸钠为硒源添加0.4mg/kg硒）、AFB1+Se组日粮（在AFB1组日粮中添加0.4mg/kg硒）21天，以组织病理学、超微病理学、生物化学法、流式细胞术及荧光定量PCR法观察研究亚硒酸钠对AFB1中毒雏鸡肾脏的作用。结果如下:
　　AFB1组肾脏脏器指数高于对照组。主要组织学变化为肾小管上皮细胞肿胀和坏死。透射电镜观察发现AFB1组肾小管上皮细胞胞浆内脂滴增多和内质网扩张。生物化学法检测肾脏功能得知，AFB1组血清肌酐、尿酸含量升高，肾脏Na+-K+-ATP酶活性降低。流式细胞术检测结果显示，AFB1组肾脏细胞的凋亡率均较对照组升高。荧光定量PCR检测发现，肾脏Bax及Caspase-3表达量增加，而Bcl-2表达量减少。细胞周期检测结果显示，AFB1组肾脏细胞阻滞在G0/G1期，细胞增殖指数降低，免疫组织化学检测到PCNA阳性细胞数量也显著降低。与对照组相比，+Se组肾脏脏器指数、组织学和肾功能均无明显变化，超微结构变化见线粒体肿胀，肾脏细胞凋亡率轻度升高，G0/G1期阻滞，且细胞增殖指数降低。与AFB1组相比，AFB1+Se组可降低肾脏的脏器指数、减轻肾脏的组织学和超微结构损伤、保护肾脏功能、减少肾脏细胞凋亡率、降低Bax及Caspase-3表达量、提高Bcl-2表达量，改善G0/G1期阻滞及细胞增殖抑制情况。
　　研究结果表明:含0.3mg/kgAFB1日粮中添加亚硒酸钠后，可减轻肾脏的病理损伤，超微结构损伤和肾功能损伤，减少细胞凋亡并通过改善G0/G1期阻滞情况和增加PCNA的表达量提高细胞增殖。亚硒酸钠能够减轻AFB1导致的肾脏损伤，其保护机理与硒对细胞周期阻滞和凋亡的调控有关。

目录

声明

摘要

缩略词表

1 文献综述

1．1 黄曲霉毒素B1简介

1．1．1 黄曲霉毒素B1的生物学性质

1．1．2 黄曲霉毒素B1的体内代谢过程

1．1．3 黄曲霉毒素B1对动物机体的影响

1．1．4 黄曲霉毒素B1的过氧化损伤

1．1．5 黄曲霉毒素B1的致癌机制

1．1．6 黄曲霉毒素B1对细胞增殖和凋亡的影响

1．1．7 黄曲霉毒素B1的检测和脱毒

1．2 硒的简介

1．2．1 硒的吸收与代谢

1．2．2 硒的生物学功能

1．2．3 硒的抗氧化作用

1．2．4 硒的抗癌作用

1．2．5 硒对细胞凋亡和增殖的影响

2 立题依据及研究目的

2．1 立题依据

2．2 研究目的

2．3 研究内容及技术路线图

2．3．1 研究内容

2．3．2 技术路线图

3 材料和方法

3．1 实验材料

3．1．1 试验动物

3．1．2 试验日粮

3．1．3 主要试剂和仪器

3．2 试验方法

3．2．1 动物分组及饲养管理

3．2．2 临床观察

3．2．3 肾脏绝对重量及脏器指数

3．2．4 病理学观察

3．2．5 血液及组织生化指标测定

3．2．6 肾脏细胞凋亡及生长周期的检测

3．2．7 实时荧光定量PCR检测肾脏凋亡蛋白mRNA含量

3．2．8 增殖细胞核抗原(PCNA)检测

3．2．9 数据处理

4 试验结果

4．1 临床观察

4．2 肾脏脏器指数

4．3 组织学变化

4．4 超微结构变化

4．5 血清学及组织生物化学指标

4．5．1 血清肌酐含量

4．5．2 血清尿酸含量

4．5．3 肾脏Na+-K+-ATP酶活性

4．6．1 流式细胞术检测细胞凋亡

4．6．2 荧光定量PCR检测凋亡蛋白mRNA含量

4．7 流式细胞术检测肾脏细胞周期

4．8 增殖细胞核抗原(PCNA)表达量

5 讨论

5．1 AFB1及添加亚硒酸钠后对肾脏组织学及超微结构的影响

5．2 AFB1及添加亚硒酸钠后对肾功能的影响

5．3 AFB1及添加亚硒酸钠后对肾脏凋亡及生长周期的影响

6 结论与创新点

参考文献

版图及说明

致谢

攻读学位期间第一作者身份发表论文