锰对中期草鱼生长、消化吸收、肠道免疫的影响及其可能途径研究

摘要

本试验旨在研究锰对生长中期草鱼生长性能、消化吸收、抗氧化、免疫能力及相关信号分子的影响，并确定生长中期草鱼锰的需要量。试验选择健康、体重均匀的生长中期草鱼540尾（264±1 g），随机分配到18个网箱中，共设置6个处理组，各组间初始体重差异不显著（P＞0.05），分别投喂含锰量为3.65（对照组），8.62，13.48，18.24，22.97和27.86 mg/kg的饲粮，试验期为8周。
　　本试验研究表明:饲粮中适宜的锰水平可以显著提高中期草鱼的末重(FBW)、增重百分比(PWG)、特异性增长率(SGR)、摄食量(FI)、饲料效率(FE)以及蛋白质沉积效率(PER)（P＜0.05）。同时本研究发现适宜的锰显著改善草鱼肝胰脏和肠道脂肪酶和胰蛋白酶活力、肠道淀粉酶以及前肠、中肠、后肠的Na+，K+-ATPase、碱性磷酸酶(AKP)、肌酸激酶(CK)和γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)活力(P＜0.05)。此外，本研究结果发现适宜的锰显著提高草鱼肝胰脏重量(HW)、肝胰脏蛋白含量(HPC)、肠长(IL)、肠重(IW)以及肠道蛋白含量(IPC)（P＜0.05），但对肝体指数(HSI)、肠体指数(ISI)和肠长指数(ILI)影响差异不显著(P＞0.05);同时显著降低肝胰脏和肠道中丙二醛(MDA)和蛋白质羰基(PC)含量，提高肝胰脏和肠道抗羟自由基(AHR)、锰过氧化物酶(MnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)活力、谷胱甘肽含量(GSH)以及肠道抗超氧阴离子能力(ASA)(P＜0.05)。进一步的研究发现，适宜的锰显著上调草鱼肠道MnSOD、GPx以及转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）的基因表达，下调了肠道Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）基因表达(P＜0.05)。此外，适宜的锰能够显著提高肠道前、中、后肠溶菌酶、酸性磷酸酶(ACP)的活力以及中肠和后肠的补体C3含量（P＜0.05），但前肠补体C3含量不受饲粮锰水平影响（P＞0.05）。进一步研究发现，锰显著下调草鱼肠道促炎细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素8(IL-8)，显著上调肠道抗炎细胞因子白介素10(IL-10)、转化生长因子β1（TGF-β1）以及信号分子雷帕霉素靶蛋白（TOR）、抑制蛋白κB(IκB)的基因表达，下调肠道信号分子核因子κB p65(NF-κB)的基因表达(P＜0.05)，同时锰显著上调肠道claudin3，claudin15，claudin b，claudin c，occludin以及ZO-1的基因表达(P＜0.05)，但是对肠道claudin12基因表达影响差异不显著（P＞0.05）。
　　综上所述，适宜量的锰能促进中期草鱼的生长，提高消化吸收能力，改善抗氧化和免疫状态，并调控相关信号分子的基因表达。本试验根据PWG以及肝胰脏和肠道中MnSOD活力进行回归分析，确定264-703 g草鱼适宜的饲粮锰需要量分别为16.91，18.82和18.21 mg/kg饲粮。

目录

声明

摘要

符号说明

1．选题背景

2．文献综述

2．1 锰在体内的代谢途径

2．2 锰的生理功能

2．3 锰对水生动物生长性能的影响

2．4 锰对水生动物消化吸收能力的影响

2．4．1 锰对水生动物消化吸收器官发育的影响

2．4．2 锰对水生动物消化吸收相关酶的影响

2．5 锰对水生动物抗氧化能力的影响

2．5．1 锰对水生动物抗氧化损伤能力的影响

2．5．2 锰对水生动物自由基清除能力的影响

2．5．3 锰对水生动物非酶性抗氧化物质含量的影响

2．5．4 锰对水生动物抗氧化酶活力及基因表达的影响

2．5．5 锰对水生动物抗氧化通路信号分子的影响

2．6 锰对水生动物免疫能力的影响

2．7 水生动物锰需要量

2．7．1 水生动物锰缺乏症

2．7．2 水生动物锰需要量

2．7．3 影响水生动物锰需要量因素

2．8 存在问题

3．研究目的和意义

3．1 研究目的

3．2 研究意义

4．试验方案

4．1 试验设计

4．2 饲粮配方及主要营养指标

4．3 试验条件及饲养管理

4．4 测定指标

4．4．1 生长性能指标

4．4．2 消化器官生长发育指标

4．4．3 消化吸收酶活力指标

4．4．4 抗氧化能力指标

4．4．5 肠道粘膜免疫指标

4．4．6 实时荧光定量指标

4．5 数据分析

5．试验结果

5．1 锰对中期草鱼生长性能的影响

5．2 锰对中期草鱼肝胰脏、肠道生长发育的影响

5．3 锰对中期草鱼肝胰脏、肠道消化吸收酶活力的影响

5．3．1 锰对中期草鱼肝胰脏、肠道消化酶活力的影响

5．3．2 锰对中期草鱼肠道刷状缘酶活力的影响

5．4 锰对中期草鱼肝胰脏、肠道抗氧化状态的影响

5．4．1 锰对中期草鱼肝胰脏抗氧化能力的影响

5．4．2 锰对中期草鱼肠道抗氧化能力的影响

5．4．3 锰对中期草鱼肠道抗氧化酶基因表达的影响

5．4．4 锰对中期草鱼肠道抗氧化相关信号分子基因表达的影响

5．5 锰对中期草鱼肠道免疫状态的影响

5．5．1 锰对中期草鱼肠道粘膜免疫物质活力及含量的影响

5．5．2 锰对中期草鱼肠道紧密连接基因表达的影响

5．5．3 锰对中期草鱼肠道细胞因子基因表达的影响

5．5．4 锰对中期草鱼肠道细胞因子相关信号分子基因表达的影响

6．讨论

6．1 锰对中期草鱼生长性能的影响

6．2 锰对中期草鱼消化吸收能力的影响

6．2．1 锰对中期草鱼肝胰脏及肠道消化酶活力的影响

6．2．2 锰对中期草鱼肠道刷状缘酶活力的影响

6．2．3 锰对中期草鱼消化吸收器官生长发育的影响

6．3 锰对中期草鱼肝胰脏及肠道抗氧化能力的影响

6．3．1 锰对中期草鱼抗氧化损伤及自由基清除能力的影响

6．3．2 锰对中期草鱼抗氧化酶活力及非酶性抗氧化物含量的影响

6．3．3 锰对中期草鱼抗氧化基因表达的影响

6．3．4 锰对中期草鱼抗氧化相关信号分子基因表达的影响

6．4 锰对中期草鱼肠道免疫能力的影响

6．4．1 锰对中期草鱼肠道黏膜免疫物质的影响

6．4．2 锰对中期草鱼肠道紧密连接基因表达的影响

6．4．3 锰对中期草鱼肠道细胞因子基因表达的影响

6．4．4 锰对中期草鱼肠道细胞因子相关信号分子基因表达的影响

6．5 生长中期草鱼锰的需要量

7．结论

参考文献

致谢

硕士攻读期间发表文章