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缬氨酸对生长中期草鱼生长、肉质和肠道免疫及其相关基因表达的影响

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摘要

本文缩略语表

1 选题背景

2 文献综述

2.1 缬氨酸对水生动物生长性能的影响

2.2 缬氨酸对水生动物肉质的影响

2.2.1 肉质的定义

2.2.2 机体氧化损伤对肉质的影响

2.2.3 缬氨酸对水生动物肉质的影响

2.4 缬氨酸对水生动物肠道粘膜免疫的影响

2.4.1 鱼类肠道粘膜免疫机制

2.4.2 缬氨酸对鱼类肠道粘膜免疫的作用

2.5 缬氨酸需要量

2.5.1 缺乏症

2.5.2 缬氨酸需要量

2.6 存在的问题

3 本研究的目的和意义

3.1 本研究的内容与目的

3.2 本研究的意义

4 试验方案

4.1 试验处理

4.2 试验基础饲粮配方组成

4.3 试验条件和饲养管理

4.4 测定指标

4.4.1 生产性能指标

4.4.2 肉质相关指标测定

4.4.3 肠粘膜免疫相关指标测定

4.4.4 检测抗氧化和肠粘膜免疫相关基因表达水平

4.5 数据处理

5 实验结果

5.1 生长性能

5.2 肌肉指标

5.2.1 肉质相关指标

5.2.2 肌肉抗氧化相关指标

5.3 肠道免疫指标

5.3.1 免疫屏障指标

5.3.2 物理屏障指标

6 讨论

6.1 缬氨酸对生长中期草鱼生长性能的影响

6.2 缬氨酸对生长中期草鱼肉质的影响

6.3 缬氨酸对生长中期草鱼肠道粘膜免疫的影响

6.3.1 缬氨酸改善草鱼肠道免疫屏障

6.3.2 缬氨酸改善草鱼肠道物理屏障

6.4 缬氨酸提高了草鱼肌肉和肠道的抗氧化能力

6.5 生长中期草鱼缬氨酸需要量

7 结论

参考文献

致谢

文章发表情况

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摘要

本实验旨在研究缬氨酸对生长中期草鱼生长、肉质和肠道免疫及相关基因表达的影响。试验选取了268±2.25 g健康草鱼540尾,分别饲喂含有不同水平的缬氨酸饲粮(4.3,8.0,10.6,13.1,16.9和19.1 g/kg)8周。实验结果表明缬氨酸能够极显著提高肌肉中粗蛋白,粗脂肪,羟脯氨酸含量和相对剪切力以及雷帕霉素靶蛋白(TOR)和核糖体S6蛋白激酶1(S6K1)的表达(P<0.01),极显著降低肌肉中组织蛋白酶B和L活力及烹饪损失(P<0.01)。同时缬氨酸极显著提高了肌肉中谷胱甘肽(GSH)含量以及Cu/Zn超氧化物歧化酶(SOD1),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和过氧化氢酶(CAT)活力(P<0.01)。进一步研究发现,适宜水平的缬氨酸极显著提高了肌肉SOD1,CAT和GPxmRNA水平(P<0.01),而缬氨酸提高抗氧化物酶的基因表达与其提高核因子相关因子2(NF-E2-relatedfactor2,Nrf2)及降低 Kelch样 ECH联合蛋白1(Kelch-like-ECH-associated protein1,Keap1)表达有关(P<0.01)。同时研究表明,缬氨酸能够极显著提高肠道中溶菌酶活力,酸性磷酸酶活力和补体C3含量(P<0.01)。同时缬氨酸极显著提高了肠道中白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β1(TGF-β1)基因表达(P<0.01),极显著降低肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)基因表达(P<0.01)。而缬氨酸对细胞因子的调节与其提高肠道中TOR和IκBα以及降低核因子-κB P65(NF-κB P65)基因表达有关(P<0.01)。同时本实验研究发现缬氨酸极显著提高了肠道occludin和ZO-1以及claudin b,claudinc和claudin3基因表达(P<0.01),极显著降低了claudin15的基因表达(P<0.01),对肠道中claudin12表达无显著性影响(P>0.05)。此外缬氨酸极显著降低了肠道中丙二醛(MDA)和蛋白羰基(PC)含量(P<0.01),极显著提高了肠道SOD1和GPx活力以及GSH含量(P<0.01)。进一步研究发现缬氨酸提高了肠道中SOD1和GPx的基因表达(P<0.01),而缬氨酸提高肠道中SOD1和GPx的表达与其提高Nrf2及降低Keap1 mRNA水平有关(P<0.01)。综上所述,适宜水平的缬氨酸可促进生长中期草鱼生长,改善草鱼肌肉品质和肌肉组织的抗氧化能力,同时调节了肌肉中抗氧化酶、Nrf2、Keap1、TOR和S6K1的表达。此外适宜水平的缬氨酸改善了草鱼肠道免疫应答,调节了肠道中紧密连接蛋白,抗氧化酶,TOR,Nrf2和Keap1基因的表达。在本试验条件下,以平均日增重为确定标识,268-679 g草鱼的缬氨酸需要量为14.00 g kg-1饲粮或4.77g kg-1蛋白。

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