丹参水提取物（DS）和丹参素（DSU）对实验性糖皮质激素性骨质疏松的作用及机制研究

摘要

目的:长期应用糖皮质激素(GC)可导致糖皮质激素性骨质疏松症(GIO),其发病率仅次于绝经后妇女骨质疏松及老年性骨质疏松.为了探讨水溶性成份丹参素对GIO的防治作用和机制,本文通过应用动物体内骨组织荧光标记和骨组织形态计量学方法、实验性骨生物力学方法、大鼠颅盖骨成骨细胞(rOB)和大鼠骨髓基质细胞(rMSCs)体外培养方法等,研究1)丹参水提取物(DS)和丹参素(DSU)对实验性GIO的防治作用及机制,特别探讨DS的体内药效学量效和时效关系;2)DS和DSU对体外rOB和rMSCs的细胞和分子生物学机制,特别探讨DS和DSU的促成骨作用、调控骨髓成骨源分化及抑制骨髓成脂肪分化的作用及其对抗GIO的作用机制.结论:(1)GC可引起生长期大鼠骨皮质形成抑制,纵向生长率抑制,松质骨骨吸收增多,髓腔脂肪组织增多,骨量下降,骨强度下降,血钙升高等骨质疏松表现.DS对生长期大鼠具有促进皮质骨合成和降低松质骨的骨吸收作用,DS可完全对抗GC所引起的骨质疏松.DS的作用与复方钙剂(含钙剂,维生素C和低剂量司坦唑醇)相当.(2)GC可引起成年期大鼠骨量减少,呈现低转换率骨质疏松,具有骨小梁骨形成率明显减少,骨吸收不变等特点.骨量减少与给药时间有关,短期(45d)主要影响骨形成率和骨小梁厚度,长期(90d)才可引起骨小梁面积下降.但腰椎骨小梁面积不下降,与腰椎的基础骨小量面积较多有关.GC对成年期骨量降低的幅度比生长期的少,可能与GC对生长期有继发PTH增多导致的骨吸收增多有关.DS能预防GC引起成年期大鼠骨质疏松,对GC/off的大鼠能增加骨形成率和骨小梁厚度,DS也可完全对抗GC作用12周的骨量减少,但不能使骨形成率升高,骨量保持低骨转换率的正平衡状态.(3)DSU是DS的主要有效成份,在体外细胞培养的研究中,DSU明显促进rOB的增殖、分化和矿化;DSU明显上调OPGmRNA表达,该作用被认为是DSU促进骨矿化和抑制骨吸收的重要机制;DSU促进rMSCs的成骨分化,抑制成脂肪诱导分化,促进GIO大鼠rMSCs成骨分化,对抗GIO大鼠rMSCs的成脂肪分化.DSU的促进成骨生成作用(osteogenesis)和抑制成脂肪(adipogenesis)作用揭示了防治GIO具有的新的作用途径.

目录

前言

第一部分糖皮质激素性骨质疏松(GIO)大鼠模型的建立

1 前言Introduction

2 材料与方法Materials and Methods

3 结果Results

4 讨论Discussion

5 结论

参考文献References

第二部分DS和DSU防治GIO体内实验研究(in vivo study)

前言Introduction

2 材料与方法Materials and Methods

3 结果Results

3 结果Results

4 讨论Discussion

5 结论 Conclusions

参考文献References

第三部分DS和DSU对体外成骨细胞(OB)和骨髓基质细胞(MSCs)的生物学机制研究(in vitro study)

1 前言Introduction

2 材料与方法Materials and Methods

3 结果Results

4 讨论Discussion

5 结论

参考文献References

第四部分GIO大鼠MSCs成骨、成脂肪的表达及DSU的作用(ex-in vivo study)

1 前言Introduction

2 材料与方法Materials and Methods

3 结果Results

4 讨论Discussion

5 结论

参考文献References

全文总结 Summary

文献综述一糖皮质激素性骨质疏松的研究进展

一 糖皮质激素对骨组织的作用

二 糖皮质激素对骨质疏松的特点

三 糖皮质激素性骨质疏松的发病机制

四 糖皮质激素对脂肪细胞分化的影响

参考文献

文献综述二心血管药物与骨质疏松

参考文献

附录一 缩略语中英对照

附录二 研究生在读期间发表的论文和研究成果

致谢

申明