睾丸扭转后对侧睾丸细胞凋亡与Fas-FasL及迟发型超敏反应（DTH）的研究

摘要

目的：研究睾丸扭转后对对侧睾丸的影响与细胞凋亡及机体免疫系统对睾丸自身抗原的应答的关系。 方法：通过建立大鼠睾丸扭转模型，设立假手术组、睾丸扭转复位组、睾丸扭转复位切除组和睾丸扭转复位+口服CsA组。于手术后2周、4周分别采用HE染色、脱氧核搪核酸末端转移酶介导的dUTP的缺口末端标记技术(TUNEL)对对侧睾丸的组织病理学和细胞凋亡进行观察；采用免疫组化和实时萤光定量PCR对Fas-FasL的蛋白表达和mRNA水平进行检测；使用游标卡尺测量睾丸扭转后对睾丸自身抗原的足垫反应。 结果：1)手术后4周睾丸扭转复位组和睾丸扭转后切除组的对侧睾丸出现曲细精管的生精上皮排列紊乱、脱落，生精上皮细胞层数减少；睾丸扭转后给予CsA组的对侧睾丸的上述病理改变明显减轻。 2)TUNEL显示，睾丸扭转2周、4周，睾丸扭转复位组和睾丸扭转后切除组的对侧睾丸可见大量的凋亡细胞，睾丸扭转后给予CsA组的对侧睾丸的凋亡细胞数明显比上述两组少。 3)免疫组化示，睾丸扭转复位组和睾丸扭转后切除组的对侧睾丸的Fas蛋白和FasL蛋白的表达升高，睾丸扭转后给予CsA组的对侧睾丸Fas蛋白和FasL蛋白表达水平未见显著变化。 4)实时萤光定量PCR显示，睾丸扭转复位组和睾丸扭转后切除组的对侧睾丸的Fas-FasLmRNA水平升高，而睾丸扭转后给予CsA组的Fas-FasLmRNA水平末见显著变化。 5)睾丸扭转复位组和睾丸扭转后切除组出现明显足垫反应，而睾丸扭转后给予CsA组的足垫反应明显受到抑制。 结论：1睾丸扭转后出现对侧睾丸生殖细胞大量凋亡，同时睾丸生殖细胞凋亡的出现和Fas-FasL表达的升高同步，提示了睾丸扭转后机体通过Fas-FasL调控对侧睾丸生殖细胞凋亡。 2睾丸扭转后激发机体对自身睾丸抗原产生DTH，表明睾丸扭转后免疫系统对自身睾丸抗原致敏。 3睾丸扭转后免疫系统对自身睾丸抗原致敏后，可能通过细胞因子等激发FasL的表达升高，从而维持睾丸的免疫豁免，但同时Fas-FasL的表达升高导致其介导生殖细胞凋亡增加。CsA能抑制这种自身免疫因而可以减轻睾丸扭转后对侧睾丸生殖细胞凋亡。 4CsA可以抑制睾丸扭转后免疫系统对自身睾丸抗原致敏和减轻对侧睾丸的损伤。CsA可以作为临床上睾丸扭转后生精功能损伤的治疗药物，但还需进一步的研究。

目录

声明

前 言

第一部分睾丸扭转后对侧睾丸细胞凋亡及FasL-Fas表达的研究

绪 论

一材料与方法

二结 果

2.1患侧睾丸扭转6小时的大体病理观察

2.2睾丸扭转6小时后对侧睾丸的病理组织切片HE染色光镜结果

2.3TUNEL检查结果

2.4免疫组化检测Fas表达

2.5免疫组化检测FasL的表达

2.6睾丸扭转后各组对侧睾丸组织FasL和Fas基因RealTime-PCR结果1

2.6睾丸扭转后各组对侧睾丸组织FasL和Fas基因RealTime-PCR结果2

2.6睾丸扭转后各组对侧睾丸组织FasL和Fas基因RealTime-PCR结果3

结 论

第二部分睾丸扭转后激发Ⅳ型迟发型超敏反应(Delayed type hypersensitivity,DTH)的研究

一绪 论

一材料与方法

二结 果

三讨 论

四结 论

总结

参考文献

文献综述1：睾丸扭转后对侧睾丸的影响及其机制

参考文献

文献综述2：FasL-Fas系统在睾丸免疫豁免的作用研究

参考文献

缩略语

致 谢