β肾上腺能受体激动剂/拮抗剂对人骨髓间充质干细胞成骨分化的调节

摘要

研究β<,2>肾上腺素能受体(ADR β<,2>R)在人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的表达及hMSCs向成骨细胞(OB)分化时ADR β<,2>R激动剂／拮抗剂对成骨指标骨形态发生蛋白2(B,MP<,2>)和核心结合因子a。(cbf α<,1>)mRNA表达的影响，从而探讨交感神经系统对成骨代谢影响的机制。 方法 抽取健康成年人的骨髓，采用密度梯度离心法获取hMSCs并培养传至3代。通过流式细胞术(FCM)和成骨诱导(OSI)来鉴定hMSCs。用荧光定量PCR检测hMSCs上ADR β<,2>R mRNA的表达。随机把hMSCs分成A组(ADR β<,2>R激动剂组)、B组(ADR β<,2>R拮抗剂组)和C组(对照组)。在将hMSCs向oB诱导分化过程中按1 μ mol／L、5u mol／L和10μ mol／L的终浓度分别向A组和B组加入沙丁胺醇和ICI-118551。用荧光定量PCR检测细胞培养至48h、72h和96h三个时间点的成骨指标BMP<,2>和cbf α<,1>mRNA的表达情况。 结果 1．发现hMSCs上存在ADRβ<,2>R mRNA的表达。 2．hMSCs成骨诱导培养0～48h，与对照组相比，ADR β<,2>R激动剂各浓度组cbfa<,1>mRNA的表达都减弱；而ADR β<,2>R拮抗剂组都增加，并且浓度为10μ mol＼L组增加的最为明显。48～96h，各组cbf a<,1>mRNA的表达都开始下降，并且随着时间的延长，各组的表达趋于相同。 3．在对照组和ADR β<,2>R激动剂组中BMP<,2> mRNA的表达随培养时间延长都是增加的，但ADR β <,2>R激动剂各浓度组明显少于对照组； O～72h，ADR β<,2>R拮抗剂组中BMP<,2>mRNA表达也是增加的，并且强于对照组，且浓度越大增强的越明显。但到72小时之后，ADR β<,2>R拮抗剂各浓度组的BMP<,2>mRNA的表达都开始下降，但仍高于对照组。 4．abf a<,1>和BMP<,2>mRNA的表达与ADR β<,2>R激动剂的作用剂量可能无关；而在ADR β<,2>R拮抗剂组，随着作用药物浓度的增加，其表达也相应的增加。 5．在48h和72h时，ADR β <,2>R拮抗剂各浓度组cbf a<,1>和BMP<,2> mRNA的表达几乎都强于对照组，而ADR β<,2>R激动剂组几乎都低于对照组，但在96h时，上述差异不明显。 结论 1．hMSCs上存在ADRβ<,2>R mRNA的表达。 2．在hMSCs向OB定向分化的过程中，ADR β<,2>R激动剂对成骨指标cbfa<,1>和BMP<,2>mRNA的表达有抑制作用，而ADRβ<,2>R拮抗剂对此有促进作用。 3．交感神经递质可能通过作用于hMSCs上的ADR β<,2>R而调节hMSCs向OB的分化过程。

目录

声明

英文缩写及中英文对照

论文摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述交感神经系统与骨代谢

致谢