灯盏花素对大鼠肺纤维化的预防作用及其机制研究

摘要

目的：探讨灯盏花素对肺纤维化大鼠肺组织纤维化过程的作用和机制。观察灯盏花素对大鼠肺组织炎症程度、胶原纤维形成的影响。在分子水平通过对TGF-β1及其下游传导通路的研究，初步探讨灯盏花素的干预机制。 材料和方法：将30只SD大鼠随机分为模型组、对照组、灯盏花素组，模型组以博来霉素气管内注入建立模型，对照组以生理盐水气管内注入，灯盏花素组以博来霉素气管内注入并以灯盏花素进行干预治疗，于第29天将大鼠处死并检测。以HE染色和细胞核颗粒计数观察肺组织炎症程度，以胶原染色检测总胶原蛋白，以免疫组化法(SP法)检测Ⅰ型胶原纤维，以原位杂交法检测TGF-βR Ⅱ mRNA和Smad4 mRNA，以实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测TGF-β 1 mRNA。 结果： 1．对照组、模型组和灯盏花素组的细胞核颗粒数分别为：11496.8、 22243.6和13465.5，模型组细胞核颗粒数大于对照组，灯盏花素组 细胞核颗粒数则明显小于模型组。显示出灯盏花素在肺纤维化形成 中可抑制炎症，进而抑制其后的炎症损伤和修复过程。 2．对照组、模型组和灯盏花素组的总胶原的I0D值分别为：0.2318667、 0.9578114和0.5116850，模型组总胶原纤维的表达较对照组明显增强，灯盏花素组胶原纤维的表达较模型组显著减弱。对照组、模型组和灯盏花素组的I型胶原的I0D值分别为：0.3234213、O.9347503 和O.3116736，也显示模型组I型胶原的表达大于对照组，灯盏花素 组则明显小于模型组。说明灯盏花素在肺纤维化过程中可抑制总胶原纤维和I型胶原纤维，而胶原纤维则是肺纤维化形成的主要结构物质。 3．对照组、模型组和灯盏花素组TGF-β1mRNA的相对拷贝数的负对数(RT-PCR法)分别为：3.006、1.914和2.712；对照组、模型组和灯盏花素组TGF-βRII mRNA的I0D值(原位杂交法)分别为：0.069868l、0.1648234和0.1809094；对照组、模型组和灯盏花素组Sma．d4 mRNA的10D值(原位杂交法)分别为：O．0735620、O.1717242和0.0956901。 从以上数据可以看出：灯盏花素对TGF-βl mRNA和Smad4 mRNA的表达有抑制作用，但未观察到灯盏花素对TGF-βRIImRNA产生有统计学意义的影响。 结论：灯盏花素可抑制炎症、抑制总胶原纤维和I型胶原纤维的合成。灯盏花素对博来霉素所致大鼠肺纤维化有一定的抑制作用。灯盏花素可能通过对TGF-βl和Smad4的抑制进而发挥抗肺纤维化的作用。

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参考文献

灯盏细辛制剂的临床应用

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