大鼠脑外伤后神经细胞凋亡及脑红蛋白表达的实验研究

摘要

研究背景及目的：脑红蛋白(Neuroglobin，Ngb)是一种主要位于脑内神经元的携氧球白，能可逆地结合O<,2>。在脑缺血缺氧时，脑红蛋白在神经元中表达增加，作为一种内源性神经保护因子可保护神经元免受缺血性损害。目前，对脑组织Ngb mRNA表达的研究主要通过采用颈动脉阻断的方法来建立缺血缺氧性脑损伤模型，而用外伤造成局灶性脑损伤模型来研究Ngb表达变化规律的方法，国内外文献尚未见报道。本研究采用硬膜外局部打击的方法建立大鼠外伤性局灶性脑损伤模型，研究伤后不同时间段和不同脑损伤区细胞凋亡和Ngb在mRNA水平表达变化规律，探讨脑外伤后Ngb对神经细胞的保护作用及其机制，以期为法医学损伤时间推断和颅脑损伤鉴定提供一种新的指标。 方法：健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组和脑损伤组。脑损伤组大鼠予木棒以700的角度在硬膜外局部打击的方法造成SD大鼠外伤性局灶性脑挫伤模型。 (1)检测打击后脑挫伤区脑血流变化情况。 (2)正常对照组直接断颈处死大鼠，脑损伤组于伤后的不同时间段断颈处死大鼠，取脑组织应用HE染色、TUNEL技术、半定量反转录一聚合酶链式反应(半定量RT-PCR)方法和图像分析技术对脑外伤后神经细胞凋亡、Ngb的表达变化规律进行研究。 结果：(1)打击后脑损伤区血流量变化为：先短时升高，然后下降，并维持在低于正常的水平。(2)脑损伤组大鼠的脑损伤区：Ngb表达在伤后15min开始下降，24h降至最低水平；打击周边损伤区Ngb表达于伤后15min即可见表达增高，12h增高达峰值；非损伤区皮质Ngb表达强于正常皮质。(3)损伤后3h出现TUNEL阳性表达；损伤后6hTUNEL阳性表达增强；伤后12h在损伤周边缘区出现峰值；伤后24小时阳性细胞分布范围扩大，损伤区TUNEI 阳性细胞率出现峰值；伤后16d，损伤区和损伤周边缘区TUNEI阳性细胞率接近正常组；非损伤区皮质TUNEI阳性细胞率接近正常组。 结论：在脑损伤急性期Ngb表达增强，神经细胞凋亡增多，随着时间的延长，Ngb表达减弱，神经细胞凋亡减少。Ngb可能在脑损伤的急性阶段对神经细胞有一定的保护作用。

目录

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述脑红蛋白生物学特征及神经保护作用研究进展

致谢

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