脑膜瘤中凋亡相关分子表达谱的检测及Survivin表达与分级和预后的关系

摘要

背景和目的：脑膜瘤（meningioma）常见，约占成人中枢神经系统肿瘤的13～26％，其发病机制不清。细胞增殖与凋亡失衡和许多肿瘤的发生关系密切。脑膜瘤中增殖与凋亡相关分子表达的研究不多，通常局限于一个或几个分子，缺乏系统研究。IAP家族是细胞内抗凋亡的重要分子，其成员Survivin在多种肿瘤中表达并与肿瘤的级别、演进、放化疗抵抗及预后密切相关，是潜在的治疗靶点。近年研究显示Survivin的亚细胞定位可能与其mRNA的不同剪接变异体有关，且Survivin核阳性与一些肿瘤的生物学行为及预后相关。少数研究报道Survivin在脑膜瘤中表达率较高，但Survivin核表达与脑膜瘤级别及预后的关系尚未见报道。 针对上述问题，本研究试图（1）系统了解脑膜瘤中凋亡与增殖相关分子的总体表达状况；（2）分析Survivin蛋白及mRNA剪接变异体在脑膜瘤组织中的表达状况，了解其与肿瘤临床病理指标和预后的关系。 材料与方法：制备脑膜瘤组织芯片（TMA）（262例），采用免疫组织化学（IHC）方法检测14种凋亡相关分子、2种增殖指标及孕激素受体的表达。利用RT-PCR检测27例脑膜瘤新鲜组织凋亡相关分子mRNA；并对cIAP-1及cIAP-2进一步采用实时荧光定量PCR分析。采用103例脑膜瘤传统组织切片和IHC，进一步分析Survivin的表达；其中48例新鲜组织作Western Blot检测；55例新鲜组织作Survivin 6种剪接变异体的RT-PCR检测。分析Survivin亚细胞定位和变异体类型与临床病理指标及预后的关系。 结果：脑膜瘤TMA研究结果显示：凋亡抑制蛋白cIAP1、cIAP2、XIAP和Survivin阳性率高，但Bcl-2阳性率随级别升高反而降低；caspase途径上游分子caspase 9阳性率高，但效应分子caspase 3、6、7等阳性率低。Survivin在脑膜瘤中可定位于胞浆和胞核，阳性率随肿瘤级别增高而升高，以胞核阳性的改变更为明显。脑膜瘤传统组织切片的IHC检测进一步证实，Survivin核阳性随肿瘤级别增高而升高，与Ki-67指数变化趋势一致。 高级别脑膜瘤中cIAP1、cIAP2的mRNA表达水平升高。Survivin的6种剪接变异体中，全长Survivin、△EX3、2B和2α阳性病例数均随级别增高而增多，以△EX3表达率最高。3B和3α未检测到。Ki-67指数与全长Survivin和△EX3的表达水平呈正相关，但脑膜瘤级别、Survivin胞浆和胞核阳性与各剪接变异体的表达缺乏相关性。 Survivin核阳性率、核分裂计数、Ki-67指数与肿瘤级别呈正相关，与患者预后（DSS和PFS）呈负相关。多因素Cox风险模型中，仅Survivin核表达水平有预后意义。Survivin剪接变异体的表达与预后无关。 结论：（1）脑膜瘤中凋亡抑制蛋白cIAP1、cIAP2、XIAP和Survivin高表达，效应caspase分子低表达，cIAP1、cIAP2的mRNA表达水平随脑膜瘤级别增加而升高。这些分子可能参与了脑膜瘤的发生发展。（2）Survivin核阳性率与肿瘤级别和Ki-67指数呈正相关。（3）Survivin各剪接变异体中，全长Survivin、△EX3、2B和2α的表达均随级别增高而上调，以△EX3表达率最高。Ki-67指数与全长Survivin和△EX3的表达水平呈正相关，但脑膜瘤级别、Survivin胞浆和胞核阳性与不同剪接变异体的表达缺乏相关性。（4）Survivin核阳性率、核分裂计数、Ki-67指数与脑膜瘤预后相关。

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缩略词表

摘要

前言

第一部分脑膜瘤中凋亡相关分子的mRNA及蛋白质表达谱检测

第二部分Survivin蛋白质和mRNA剪接变异体在脑膜瘤中的表达及其与分级和预后的关系

参考文献

[综述]Survivin的结构、功能及其在肿瘤中的研究进展

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