CODIS系统三个miniSTR荧光标记复合扩增的构建及法医学应用

摘要

目的:对TH01、TPOX、CSF1PO三个基因座PCR-miniSTR和普通引物PCR-STR的结果进行一致性检验；构建TH01、TPOX、CSF1PO三个基因座miniSTR荧光标记复合扩增体系：对该荧光标记复合扩增体系进行法医学应用性研究。 方法:参照Bulter等对TH01、TPOX、CSF1PO三个基因座miniSTR的引物设计，选用本教研室提供的123例无血缘关系个体的血样，进行TH01、TPOX、CSF1PO三个基因座PCR-miniSTR银染检测，检测结果与商品化试剂盒的检测结果进行一致性检验；采用国产DNA聚合酶构建miniSTR荧光标记复合扩增体系，用美国ABI-310基因分析仪进行检测；对该荧光标记复合扩增体系的灵敏度、准确性、种属特异性、不同退火温度下复合扩增的效果、陈旧血痕DNA的检测等进行研究。 结果:123例无血缘关系个体的TH01、TPox、CSF1PO三个基因座PCR-miniSTR银染检测结果与商品化试剂盒检测结果一致；成功建立了TH01、TPOX、CSF1PO三个基因座miniSTR荧光标记复合扩增体系，该体系的的退火温度范围较宽，以60℃为最佳，检测灵敏度为0.25ng模板DNA，扩增准确性高，具有较高的种属特异性，可以应用于陈旧血痕DNA检测。 结论:TH01、TPOX、CSF1PO三个基因座PCR-miniSTR结果可以与该三个基因座普通引物PCR-STR的结果进行比对，具有数据库兼容性；该荧光标记复合扩增体系可应用于ABI-310检测平台，扩增灵敏度高，条件易于优化、分型结果稳定，种属特异性好，可应用于法医学实际检案。

目录

声明

前 言

第一部分 THO1、TPOX、CSF1PO三个基因座PCR-miniSTR和普通引物PCR-STR的一致性检验

材料与方法

结果

讨论

结论

第二部分 HTO1、TPOX、CSF1PO基因座miniSTR荧光标记复合扩增的构建及法医学应用

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 miniSTR的研究进展

附录

致谢

研究生简历