筛选血管外膜细胞表型转化相关基因及对骨桥蛋白功能的研究

摘要

外膜在血管重塑中的作用近年来备受重视。为了寻找血管外膜成纤维细胞（adventitialfibroblasts,AF）转化为肌成纤维细胞（myofibroblasts,MF）相关的基因，我们使用差异显示PCR（differentialdisplayPCR,DD-PCR）技术筛选两种细胞表型中差异表达的基因。并对某些基因进行NorthernBlot鉴定。进一步对其中一条已知基因骨桥蛋白（osteopontin,OPN）做了功能方面的研究。结果表明：1、共获得29条差异表达片段，其中17条已知基因，涉及mRNA转录、蛋白质翻译、信号转导、能量代谢等方面。另有12条ESTs。AF/MF表型转化是多基因网络调控的结果.2、反义OPN预处理AF再用TGFβ1刺激，抑制了α-SM肌动蛋白的表达.3、血管外膜细胞在TGFβ1刺激或血管受损时OPNmRNA和蛋白表达水平升高.4、OPN对外膜细胞的趋化作用呈剂量依赖性.5、MF迁移性强于F.6、自发性高血压大鼠（spontaneouslyhypertensiverat,SHR）AF迁多活性强于京都种WKY大鼠（Wistar-Kyotorats,WKY）,OPN在其中发挥作用。

目录

引言

第一部分差异显示PCR筛选血管外膜成纤维细胞与肌成纤维细胞表型转化中差异表达的基因

第二部分 OPN在外膜细胞表型转倾及迁移中所起的作用

实验一 OPN对血管外膜成纤维细胞与肌成纤维细胞表型转化所起的作用

实验二OPN在血管外膜中的表达及对外膜细胞迁移影响的体外研究

实验三 OPN在血管外膜中的表达的在体研究

实验四 SHR AF迁移活性的增强及相关机制的探讨

结论

参考文献

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综述

致谢

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